产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50管/48样 | ￥ 350 | 10 |
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
ICDHc（EC 1.1.1.42）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸，同时还原NADP+生成NADPH。ICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源，在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。
测定原理：
利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应，在340 nm下测定NADPH浓度的增加。
所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体50 mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，4℃保存；
试剂三：粉剂×1支，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支，-20℃保存；
样本的前处理：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂二转移至试剂一中充分溶解，置于37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）水浴中预热10min左右；用不完的试剂4℃保存。
3、 在试剂三中加入550μL蒸馏水充分溶解，置于37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）水浴中预热10min左右；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
4、 在试剂四中加入550μL蒸馏水充分溶解，置于37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）水浴中预热10min左右；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
5、 操作表：
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 试剂一 | 750 |
| 试剂三 | 10 |
| 试剂四 | 10 |
| 样本 | 30 |
将上述试剂按顺序加入1 mL石英比色皿中，加样本的同时开始计时；混匀，在340nm波长下记录20s时的初始吸光度A1和2min20s时的吸光度A2，计算ΔA=A2-A1。
