规格 | 价格 | 库存 |
---|---|---|
50管/48样 | ¥ 400 | 10 |
测定意义
在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。
测定原理
在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵或匀浆器、水浴锅、酶标仪、96孔酶标板、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液一:液体50 mL×1瓶,室温保存。
提取液二:液体50 mL×1瓶,室温保存。
提取液三:液体50 mL×1瓶,室温保存。
提取液四:粉剂 100 mg ×1支,室温保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理
称取样品约0.5g,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5 mL提取液二,震荡摇匀,加0.5 mL 提取液三,用镊子加少量提取液四(约2 mg),静置30min,10000 rpm,25℃,离心15 min,取上清液待测。
测定步骤和操作表
| 空白管 | 测定管 |
样品(mL) |
| 0.05 |
试剂一(mL) | 0.1 | 0.1 |
试剂二(mL) | 0.1 | 0.1 |
H2O | 0.05 |
|
混匀,室温静置15min,以空白管调零,测定A540 (注:空白管只需测定一次)。 |
亚硝酸含量计算
标准曲线回归方程为:y= 0.011x + 0.0216,R2= 0. 9991
=×(A540测定管 - 0.0216) × 5×1.5÷样品质量
= 0.682×(A540测定管 - 0.0216) ÷样品质量
注意事项
1. 试剂盒2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
3. 若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.03浓缩,A540 > 2.8 适当稀释)。