产品描述:
羟基茶酚蓝(HNB)指示染料,可与Mg2+形成复合物,为紫罗兰色。在 LAMP反应中由于大量焦磷酸盐的形成,焦磷酸盐将螯合掉Ma2+。使得HNB的颜色变为天蓝色,因此该试剂可作为LAMP反应的指示染料,阳性扩增样品为天蓝色,而阴性仍然保持紫罗兰色。HNB变色染料可与UDG LAMP防污染扩增试剂盒搭配使用从而建立可视化检测方法
使用方法:
1.该制品为冻干品形式,首次使用前使用0.2ml ddH2O溶解后使用,溶解后使用为50×浓度。溶解前可保存于室温,溶解后制品要保存在-20℃以下。
2.参考UDG LAMP防污染扩增试剂盒配制反应体系在0.2ml EP反应管中加入下述试剂:
10xIsothermo Buffer(Mg2+ free) 2μl
Bst6.0 DNA/RNA Polymerase(8U/μl) 0.5~1μl
10mM dUTP Mixture 1.6μl
溶解后的HNB染料(50x) 0.4μl
100mM Mg2+ 1.2μl
LAMP Primer Mix 1-2μl
模板DNA or RNA 1μl
ddH2O到总体积 20μl
3. 反应体系配好后,置于60~65℃(首次实验采用60℃)进行反应30~60min。
存储:RT
注意事项:
HNB搭配的最佳Mg2+浓度为6mM,即20μl 反应体系中加入1.2μl 的Mg2+(10mM)。