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发光法细胞活力检测试剂盒
产品名称:
发光法细胞活力检测试剂盒
产品编号:
YS0069
产品类别:
分光法检测盒
存储条件:
-20℃
保质期:
一年
[价格]
规格 价格 库存
YS0069S-100次 ¥ 600 2
YS0068M-500次 ¥ 1980 1
YS0068L-2500次 ¥ 6480 1

产品详情

 产品简介:

CellTiter-Lumi Steady发光法细胞活力检测试剂盒(CellTiter-Lumi Steady Luminescent Cell Viability Assay Kit),简称CTL Steady发光法细胞活力检测试剂盒或CTL Steady,是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高信号稳定性、超高灵敏度、超宽线性范围定量检测活细胞数目的试剂盒。本产品和同类产品相比,最大的特点是发光信号特别稳定,1小时内信号整体上下波动范围通常不超过±10%,特别适用于待测样品数量较多、耗时较长且须前后数据进行比较的多孔板中细胞活力的大批量连续测定,也特别适用于高通量筛选(high-throughput screening)的自动化操作系统。 
 使用说明:
1. 细胞的准备:使用适合进行化学发光检测的96孔板,每孔接种100μl细胞(如使用384孔板,每孔接种25μl细胞,具体用量视不同类型的  384孔板而定),并确保检测时每孔的细胞数量在3万个以内(如使用384孔板宜控制在6千个以内),同时设置不含细胞的培养液孔作为阴性对照,按照细胞培养的常规方法培养细胞。如有需要,可加入药物处理细胞。此外,如有必要,也可以设置细胞的浓度梯度,以便后续确定试剂盒的使用效果。
2. ATP标准曲线的设置(选做):把自备的ATP标准溶液用PBS或细胞培养液稀释成适当的浓度梯度。初次检测可以设置0、3、10、30、100、300、1000、3000nM这几个浓度,96孔板每孔加入100μl的标准品。如有必要,在后续的实验中可以根据细胞中的ATP含量对标准品的浓度范围进行适当调整。如果用细胞培养液来稀释ATP标准品,稀释后需立即进行后续的发光检测,否则培养液中的ATPase等可以消耗ATP的酶会导致ATP含量下降。
3. 检测试剂的准备:
a. 融解冻存的CellTiter-Lumi Steady发光法检测试剂,如有必要可适当分装该试剂。经测试反复冻融5次对其检测效果无显著影响。
b. 按照96孔板每孔100μl (384孔板每孔25μl)的量,取适量CellTiter-LumiSteady发光法检测试剂,平衡至室温。
4. 细胞活力检测:
a. 取出细胞培养板在室温平衡10分钟(通常不宜超过30分钟)。
b. 96孔板每孔加入100μl CellTiter-LumiSteady发光法检测试剂(384孔板每孔25微升)。
c. 室温振荡2分钟,以促进细胞的裂解。
d. 室温(约25ºC)孵育10分钟,使发光信号趋于稳定。
e. 使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光检测。请根据仪器要求设置相应的参数,每个孔的检测时间一般为0.25-1秒或更长时间,具体需根据仪器的检测灵敏度进行适当的调整。

根据化学发光读数直接计算细胞的相对活力,或根据ATP标准曲线计算出ATP的量从而计算出细胞的相对活力。 

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