| 产品及特点 | 副溶血性弧菌（Vibrio parahemolyticus）是一种海洋细菌，主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。进食含有该菌的食物可致食物中毒，也称嗜盐菌食物中毒。潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右，起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热，腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部，腹泻每日3～20余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便，约2%～16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样或粘液血样，对人体健康具有巨大危害，因此快速检测具有重要意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发，它具有下列特点： - 即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
- 引物经过精心优化，专一性强，只扩增副溶血性弧菌。
- 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
- PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
- 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
- 本产品只能用于科研。
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| 规格及成分 | | 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 | | PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（亮黄盖） | | 超纯水 | 100935 | 1 mL（蓝色） | | 副溶血性弧菌PCR引物混合液 | 13-14870yw | 100 μL（白盖） | | 副溶血性弧菌PCR阳性对照 | 13-14870pc | 100 μL（黄盖） | | 天净沙DNA释放剂试用装 | 130982 | 50次（试用装） | | 使用手册 | 13-14870sc | 1份 | | |
| 运输及保存 | 低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。 | |
| 自备试剂 | 样品DNA。 | |
| 使用方法 | 一、样品DNA的制备 - 如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
- 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。其使用手册可联系客服发送。
二、设置PCR反应（40 μL体系） - 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2个
样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 | | PCR MagicMix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL | | 副溶血性弧菌 PCR引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL | | N+2个样品DNA模板 | 各18 μL | - | - | | 样品制备阴性对照 | - | 18 μL | - | | 样品制备阳性对照 | - | - | 18 μL | - 按下表设置PCR反应：
| 过程 | 温度 | 时间 | | 预变性 | 94℃ | 5 min | PCR反应
（35个循环） | 94℃ | 20 sec | | 58℃ | 20 sec | | 72℃ | 30 sec | | 最后延伸 | 72℃ | 10 min | 三、电泳检测 - 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
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| 关联产品 | 副溶血性弧菌可视化LAMP扩增试剂盒 | |
