规格 | 价格 | 库存 |
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100T | ¥ 198 | 200 |
尿素(Urea)检测试剂盒
(二乙酰一肟微板法)
一、产品简介:
尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide),是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物,也是目前含氮量最高的氮肥;尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法后者被认为是间接方法,先经尿素酶分解尿素为铵离子,然后根据波氏反应,检测铵离子的生成量。
尿素(Urea)检测试剂盒(二乙酰一肟比色法)检测原理是在酸性条件下加热一定时间,尿素与二乙酰缩合,生成红色二嗪(diazine),该反应被称为 Fearon 反应,颜色深浅与尿素含量呈正比,通过分光光度比色法(酶标仪)测定 540nm 处吸光度,该试剂盒可用于检测人体动物的血浆、血清、尿液等样品中尿素(旧称尿素氮,BUN)含量,尿液样品可直接检测,无需处理。
该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
二、产品组成:
名称规格(YS1171) | 100T | 存储 |
试剂A:尿素标准 (100mmol/L) | 1ml | 4℃ |
试剂B:尿素标准稀释液 | 1ml | RT |
试剂C:Diazine显色液 | 3ml | 4℃避光 |
试剂D:Urea Assay Buffer | 30ml | 4℃避光 |
三、自备材料:1.5ml离心管、水浴锅或恒温箱、96 孔板、酶标仪
四、操作步骤:
1、准备样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定,-20℃℃冻存。尿液中尿素含量较高,应先用蒸馏水作1:50 稀释后再测。
2、配制标准品工作液:取适量的尿素标准(100mmol/L),按尿素标准(100mmol/L):尿素标准稀释液=1:19 的比例混合,使浓度达到 5mmol儿,即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L);4℃℃保存,1 周有效。
3、Urea 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 Urea 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
加入物(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
尿素标准稀释液 | 5 | — | — |
尿素标准(5mmol/L) | — | 5 | — |
代测样品 | — | — | — |
Diazine显色液 | 25 | 25 | 25 |
Urea Assay Buffer | 250 | 250 | 250 |
4、Urea 检测:充分混匀,沸水水浴,置于冷水中冷却,加入至 96 孔板,酶标仪检测 540nm吸光度,以空白孔调零,读取标准孔、测定孔的吸光度,分别为A标准、A测定。
五、计算。
血清尿素(mmol/L)=(A测定/A标准)x5mmol/L
式中:
A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
血清尿素氮(mg/L)=尿素(mmol/L)x28
参考区间:成年人血清尿素:2.9 ~ 8.2mmol/L
六、注意事项:
1、二乙酰一肟比色法线性范围为 14mmol/L,如果浓度较高,需用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。
2、一般显色后应立即检测,否则会有轻度褪色。
3、尿液样品中一般尿素含量较高,样品需用 1:50 稀释,如果显色后吸光度仍超过本法的线性范围,还需将稀释尿液,再行稀释重新检测。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
七、有效期:6个月有效,常温运输,按要求保存。