规格 | 价格 | 库存 |
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100T | ¥ 198 | 1 |
尿素(Urea)检测试剂盒
(脲酶波氏比色法)
一、产品简介:
尿素(Urea)又称碳酰胺(carbamide) ,是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主 要含氮终产物 ,也是目前含氮量最高的氮肥;尿素检测方法大致分为化学方法和酶学方法, 后者被认为是间接方法,先经尿素酶(脲酶)分解尿素为铵离子,然后根据波氏反应检测铵离 子的生成量。
雅吉生物尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)检测原理是尿素酶水解尿素,产生氨 和二氧化碳,氨在碱性条件下与苯酚等反应生成蓝色吲哚酚,吲哚酚的生成量与尿素含量呈 正比 ,通过分光光度计测定 560nm 处吸光度 ,可用于测定人体、动物的血浆、血清、尿液 等样品中的尿素(旧称尿素氮 ,BUN)含量,但尿液最好经过处理后再行检测。
该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
二、产品组成:
名称规格(YS1167) | 100T | 存储 |
试剂(A): 尿素标准(100mmol/L) | 1ml | 4℃ |
试剂(B): 脲酶溶液 | 0.5ml | -20℃ 避光 |
试剂(C): 脲酶稀释液 | 25ml | RT |
试剂(D): Urea 显色液 | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂(E): Urea Assay Buffer | 100ml | 4℃ 避光 |
试剂(F): ddH2O | 10ml | RT |
三、自备材料:
1、 无氨蒸馏水
2、 水浴锅或恒温箱、离心管或小试管、分光光度计、 比色杯、沸石
四、操作步骤:
1、准备样品:
①血浆、血清:血浆、血清按照常规方法制备,直接用于尿素的测定,-20℃冻存。
②尿液:尿液样品最好处理后测定,方法如下:取0.6ml尿液样品,加入沸石0.3g,加
入无氨蒸馏水至 15m1,反复震荡数次,吸附尿液中的游离铵盐,静置后,吸取稀释尿液,所测结果乘以 25,如果尿液比较少,可以等比例减少各试剂的使用量。举例:取1m尿液样品,应加入沸石 0.5g,加入无氨蒸馏水至 25ml,反复震荡数次,吸附尿液中的游离铵盐,静置后,吸取稀释尿液,所测结果乘以 25。
2、配制标准品工作液:取适量的尿素标准(100mmol/),按尿素标准(100mmol/L):
ddH2O=1:19 的比例混合,使尿素浓度达到5mmol/,即为标准品工作液-尿素标准
(5mmol/L);4℃保存,1 周有效。
3、配制脲酶工作液:取适量的脲酶溶液,按脲酶溶液:脲酶稀释液=1:99的比例混合
即为脲酶工作液;4℃避光保存,1个月有效。
4、Urea 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注
意避免产生气泡;如果样品中的 Urea 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进
行测定。
5、Urea 检测:充分混匀,37°水浴 20min,分光光度计检测560nm 处吸光度,比色杯光径 1.0cm,空白管调零,读取各管吸光度,分别为A标准、A测定。
五、计算。
尿素(mmol/L)=(A测定/A标准)x 5mmol/L
式中:
A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
参考区间:成年人血清尿素:2.9 ~ 8.2mmol/L
六、注意事项:
1、 本实验可测定 560 和 630nm 处的吸光度。
2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定,但应注意加入试剂量不同,相应的检测
次数会大大增加。
3、 避免使用铵盐抗凝剂 ,否则会使结果偏高。
4、 高浓度氟化物可抑制尿素酶 , 引起结果假性偏低。
5、 采用酶标仪未调零情况下,空白管 OD 值一般在 0.08~0.18 之间,5mmol/L 标准管参 考范围一般在 0.35 ~0.55 之间。
6、 以肉眼观察 ,一般情况下尿素浓度≤1mmol/L 可显淡绿色或淡蓝色 ,浓度≥2mmol/L 即可显蓝色,浓度≥15mmol/L 即可显深蓝色,一般情况下接近上限比接近下限更准确。
7、 为了您的安全和健康 ,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、 试剂开封后请尽快使用 ,以防影响后续实验效果。
9、 为了您的安全和健康 ,请穿实验服并戴一次性手套操作。
七、有效期:6个月有效,常温运输,按要求保存