| Bst 2.0 DNA 聚合酶来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，通过基因工程手段去除了其5’-3’外切酶活性，而保留了5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力，因此是Isothermal amplification (LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高, 同时，该酶可以使用dUTP作为底物进行扩增(Bst大片段无此活性)。 |
Bst DNA聚合酶性能比较 |
| | 扩增速度 | 逆转录活性 | 杂质耐受性 | dUTP识别能力 | 应用 | | Bst大片段 | * | * | * | N/A | 常规链置换反应 | | Bst 2.0 | ** | ** | ** | **** | DNA LAMP SDA反应 | | Bst 3.0 | **** | *** | **** | ** | LAMP和RT-LAMP反应 | | Bst 4.0 | **** | ***** | **** | ** | RT-LAMP最佳用酶 | |
组分 |
| 组分名称 | 数量 | | Bst 2.0 DNA Polymerase (8 U/μl) | 200 μl/2 ml | | 10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) | 1 ml×2/20 ml | | 100 mM Mg2+ | 1 ml×2/20 ml | |
应用 |
- DNA等温扩增
- 富含GC结构的快速测序
- 微量模板DNA的快速测序
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单位定义 |
| 一个活力单位即在65°C条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。 |
热失活 |
| 85°C，5min。 |
LAMP引物设计与实验指南
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LAMP原理 |
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储存 |
| -20℃可保存3年。 |
实例 |
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| 应用Bst 2.0 dna 聚合酶和6条引物进行LAMP实验，1-4：不加酶，0.1μl酶，0.25μl酶，0.5μl酶。 |
