| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50T | ¥ 4400 | 20 |
克里米亚-刚果出血热病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
本产品是根据探针法荧光定量 RT-PCR 原理开发的PCR检测试剂盒,它具有下列特点:(如需更详细的完整说明书,可联系客服添加微信或QQ免费索取。)
1. 即开即用,用户只需要提供样品 RNA 模板。
2. 引物等组分经过优化,灵敏度高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据DNA/RNA 序列高度保守区设计,不会跟其他病毒的 RNA 发生交叉反应。
5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 个数量级。
6. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
7. 本产品只能用于科研。
保存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
使用方法
一、提取(样本制备区)
用自选方法提取纯化样品 RNA/DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。建议使用病毒基因组 DNA/RNA 提取试剂盒提取。
二、稀释标准曲线样品(样本制备区)
(由于阳性对照浓度高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,避免污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光模板稀释液,(最好用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。若无需制作标准曲线,将阳性对照稀释到 1×10E5 拷贝/μL 即可。
克里米亚-刚果出血热病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒结果分析
1. 如果制作标准曲线,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 RNA 浓度的 log 值,推算出其浓度。
2. 如果未制作标准曲线,按照如下标准判定结果:阳性对照(1×10E5 拷贝/μL)结果:Ct 值<30,有明显指数增长,呈典型的 S 型曲线。阴性对照结果:Ct 值>40 或无 Ct 值,无明显指数增长期和平台期。样本检测结果:Ct 值<38,有明显指数增长,表明样本中检测出该病毒,结果为阳性;Ct 值>40 或无 Ct 值,表明样本中未检测出该病毒,结果为阴性;Ct 值在 38-40 范围,应对样本进行复检,如重复实验结果 Ct 值仍在 38-40 范围,有明显指数增长,则判定为阳性,否则为阴性。
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