规格 | 价格 | 库存 |
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50T | ¥ 2400 | 200 |
伪狂犬病病毒PCR试剂盒(Pseudorabies Virus,PrV)又称猪疱疹病毒Ⅰ型、传染性延髓麻痹病毒、奇痒症病毒、奥叶兹基氏病病毒。是引起牛、羊、猪、犬和猫等多种家畜和野生动物发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的疱疹病毒。由于本病的临床症状类似狂犬病,故也用“伪狂犬病”这一病名。伪狂犬病与狂犬病毒并没有关系,而是属于疱疹病毒。因此快速灵敏检测伪狂犬病病毒具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增伪狂犬病病毒,与其他微生物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
本试剂盒足够做 40μL 体系的PCR 50 次,但只能用于科研。
成份 | 编号 | 十孔盒包装 |
PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
伪狂犬病病毒PCR 引物混合液 | 同 13-35100yw | 100 μL(白盖) |
伪狂犬病病毒PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 同 60908-35100pc | 50 μL(黄盖) |
天净沙核酸释放剂(试用装) | 61202 | 20 次(1 mL,绿盖) |
使用手册 | 同 13-35100sc | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其
他试剂
样品 DNA
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次天净沙核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站天净沙核酸释放剂或产品编号 61202 下载。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品
制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用
二、设置PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个PCR 管中分别加入下列成分:
成分N+2 个PCR 阴性PCR 阳性
样品管对照对照
PCR MagicMix 3.0各 20 μL20 μL20 μL
伪狂犬病病毒 PCR 引物各 2 μL2 μL2 μL混合液
N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL--
PCR 阴性对照(水)-18 μL-
PCR 阳性对照(伪狂犬病
病毒 PCR 阳性对照的--18 μL 1000 倍稀释液)
4. 按下表设置 PCR 反应:
、电泳检测
取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 100bp。阳性对照必须有条带出现,阴性对照必须无任何扩增, 否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。