操作步骤
1.取出电泳后的聚丙烯酰胺凝胶，用双蒸水冲洗凝胶，根据以下程序所需要的试剂量，取一定量的溶液B和D用双蒸水稀释成1倍的溶液待用，以下步骤在室温下进行。
2.加入20 mL双蒸水，置于摇床上，振荡5 min。
3.倾出双蒸水，加入含50%乙醇和12%乙酸的固定液20 mL及溶液A 55 μl，置于摇床上，振荡60 min。
4.倾出溶液，加入20 mL 50%的乙醇，置于摇床上，振荡5 min，重复3次。
5.倾出50%的乙醇，加入20 mL 1倍体积的溶液B，置于摇床上，振荡1 min。
6.倾出溶液B，加入20 mL双蒸水，置于摇床上，振荡1 min，重复3次。
7.倾出双蒸水，依次加入20 mL溶液C和43 μl溶液A，置于摇床上，振荡20 min。
8.倾出混合液，加入20 mL双蒸水，置于摇床上，振荡1 min，重复2次.
9.倾出双蒸水，加入20 mL1倍体积的溶液D和28 μl溶液A，缓慢摇动，直至蛋白质条带具有足够的显色强度（约2~3 min）。
10. 倾出溶液D与溶液A的混合液，加入含50%乙醇和12%乙酸固定液20 mL终止显色反应，置于摇床上，振荡5 min。
11. 倾出液体，加入20 mL双蒸水，置于摇床上，振荡5 min后观察显色条带及后续实验。
注意事项
1.为防止杂质的干扰，操作时请注意尽量使用高纯度的水和洁净的玻璃器皿。
2.用水稀释后的干粉溶液对光敏感，易见光分解，蒸发，故请在暗室中取用，并避光保存于冰箱冷藏室中。
3.实验前根据所染胶块的数量，取一定体积的需要稀释的浓缩液，用双蒸水稀释为一倍浓度后再使用。
4.过程中所加试剂量是针对80×60×1 mm凝胶而定，若体积较大，可适当增加各溶液的体积。
5.若凝胶较厚或操作温度较低时，各步骤需适当延长时间。
6.染色及染色后的清洗，显色和终止的时间要控制好，否则胶的背景变深，反之银染灵敏度变低。
7.溶液A及干粉有一定的刺激性和毒性。操作时须在化学通风橱中进行，并戴上一次性手套。
8.产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
9.使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
10. 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担责任。
