5’-RACE试剂盒包含逆转录酶、重组末端转移酶和扩增酶。Reverse Transcriptase Mix(RNase H-)含有dNTP、RNase Inhibitor、Reverse Transcriptase、Reverse Transcriptase Buffer等,逆转录酶可逆转录全长15kb的cDNA片段,具有高灵敏度和快速扩增等特点,由于其热稳定性高(高达55°C),对于富含GC或具有复杂二级结构的RNA模板有明显优势。该逆转录酶可以实现高效的cDNA合成。本试剂盒应用了套式(巢式)PCR原理,用嵌套的特异性引物和PCR锚定引物,增加了PCR扩增的特异性与灵敏度,可以对少量样品或低丰度的基因进行5’RACE实验,并且对长片段的5’RACE扩增具有明显优势。Taq SuperMix含有dNTP、Mg2+、Taq酶、Buffer等,扩增得到的PCR产物的3’端附有一个“A”碱基,可直接克隆于T-Vector中测序,如条带单一可以直接用R2引物测序。试剂盒中提供的Control Total RNA,使用Control Primer可扩增出Human(GAPDH)基 因5’末端391 bp的DNA片段。
快速扩增全长,用于功能基因的研究、蛋白表达等。
试剂盒中提供的Taq SuperMix、Reverse Transcriptase Mix(RNase H-)用完后及时放入-20°C冻存。
5'adaptor Primer、5'RACE Outer Primer、5'RACE Control Outer Primer、5'RACE Control Inner Primer、dCTP、Control Total RNA、RNase H Mix、5×TdT Buffer、TdT酶、RNase-free water、Reverse Transcriptase Mix(RNase H-)、Taq SuperMix
动物、植物、病毒等