通用型全基因组扩增试剂盒-上海雅吉生物科技有限公司

规格	价格	库存
50T	￥ 1980	200

通用型全基因组扩增试剂盒是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点：

微卫星差异，SNP，STR）等。

自备试剂

超纯水（无 DNA 和 DNase 污染）

运输及保存

低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法

本产品适用于纯化好的基因组DNA。

一、碱变性（碱变性法一般好于热变性法，推荐用户使用）

在PCR 塑料管中加入不超过 2.5uL 纯化好的基因组DNA 或用量在100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
加入等体积（2.5μL）变性液，轻柔吹打混匀。

室温放置2-5分钟。
加入5uLWGA中和液。此时样品总体积为10uL。二、WGA反应
在10uL DNA样品中，加入10 μL的 WGA Mix，轻柔吹打混合均匀。
加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶（10U/uL），轻柔吹打混合均匀。
30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。
扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存
用本产品扩增 10 ng 纯化好的藻基因组DNA，反应体系为 10 μL，扩增时间为 8 h。取 5 μL 样品电泳，第一泳道为 Marker（最大片段为 15 Kb），第 2~5 泳道扩增样品的引物浓度分别为 100,200,300,400 μM。染料为绿如蓝核酸染料
WGA 原理图圆球表示phi 29DNA 聚合酶
短蓝线表示随机引物
棕色线表示新合成的DNA

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