首页 > 生化试剂盒 > 生化试剂盒
FITC偶联试剂盒
产品名称:
FITC偶联试剂盒
英文名称:
FITC conjugation kit
产品编号:
D601049
产品类别:
生化试剂盒
存储条件:
冷藏(2-8℃)
[价格]
规格 价格 库存
1mg ¥ 1600 11

产品详情

产品简介:

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。

荧光素标记抗体简称荧光抗体(FA),是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流式细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取 IgG、IgM 后再作标记。

本试剂盒中的荧光素采用高质量进口的异硫氰酸荧光素(FITC),FITC 标记抗体的原理是利用FITC上的N=C=S 基团和抗体上游离的-NH2 发生化学形成 FITC-抗体结合物,即荧光抗体。一般一个IgG分子可结合2-8个分子的FITC。

产品组成:

名称

包装规格

FITC

1 支(避光)

调整缓冲液

50ul

DMSO

150ul

纯化柱

2支

收集管

2个

 产品规格:标记100ug-1mg抗体

标记操作步骤:

1. 抗体准备

1.1. 建议抗体浓度在 1-2mg/ml 之间。

1.2. 抗体中不要含有 BSA 或其它蛋白质成分。

1.3. 抗体缓冲液中不要含有氨基的盐(如:Tris,NaN3等),pH在6.5-8.5为宜。

2. 抗体标记

2.1. 取出FITC离心数秒,将管中FITC干粉甩至管底;

2.2. 管中加入50ul DMSO用移液枪反复吹打或 vortex 混匀至 FITC 完全溶解;

2.3. 抗体中加入适量调整缓冲液(每100ul抗体中加入10ul 调整缓冲液);

2.4. 将溶解后的 FITC 加入抗体中(每100ug抗体中加入4.0ul FITC), 用移液枪反复吹打或 vortex 混匀。

2.5. 将抗体-FITC 混合物置水平摇床或旋转混匀仪,在摇动状态下室温避光(反应管可包裹锡箔纸)反应 1h。

注: 如果需要较高 F/P 值,可适当延长抗体和FITC偶联时间。

3. 游离FITC去除

3.1. 取出纯化柱,将纯化柱 3000rpm 离心 2min。

3.2. 暂时保留收集管中的缓冲液。

3.3. 将纯化柱移至新的收集管上,吸取抗体-FITC偶联物置纯化柱中填料的表面。如果样品体积小于50ul,应先用3.2保留的缓冲液将液体量补足50ul。上样体积最大不要超过100ul。

3.4. 待样品渗入填料后,3000rpm 离心2min。

3.5. 将抗体-FITC 标记物 4℃避光保存待用,终产品可4℃可避光保存 1 年。

注意事项:

1. 试剂盒保存在2-8℃, 勿冻存。

2. 试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒,会使液体或干粉试剂沾到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。

3. FITC 需现用现配,溶解后的 FITC 不能长期保存。

4. 纯化柱中的缓冲液含有毒性成分叠氮化钠(NaN3),使用时避免与皮肤,眼睛和黏膜接触。

5. DMSO属微毒类,对人体皮肤有渗透性,对眼又刺激作用,使用时避免与皮肤,眼睛和黏膜接触。

6. 标记前抗体的透析,浓缩和浓度测定等操作都会造成抗体量的损失,因此标记前准备抗体时需根据具体情况考虑最适宜的抗体量。

保存条件:2-8℃避光保存,一年有效。勿冻存。

联系我们

TEL:021-34661275  点击拨打热线