规格 | 价格 | 库存 |
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50T | ¥ 2800 | 200 |
分 187 种亚型。。大肠杆菌 O 抗原即脂多糖(LPS),对其多样性的分析对流 行病学研究和疾病监控预测有重要意义。目前已知大肠杆菌 O 抗原的编码基 因位于 rfb cluster,本产品就是根据 O1 亚型基因保守序列设计引物并开发的 O1 型大肠杆菌专一性 PCR 诊断试剂盒。它具有下列特点:
1.使用即用型 PCR 试剂盒,客户不需要准备各个成分,减少了操作步骤, 降低了操作误差。
2. 专一性强,只检测 O1 型大肠杆菌,对其他 O 型大肠杆菌无交叉反应。
3. 灵敏度高,每次 PCR 反应最低可以检测数百拷贝 O1 型大肠杆菌基因组。
4. 本产品足够至少 50 次 PCR 检测(40uL 体系,含阳性对照和阴性对照)。
成份 | 编号 | 十孔盒包装 |
即用型 PCR Mix 3.0(含染料) | 90805a | 1 mL(A 袋) |
超纯水 | 100935 | 1 mL(A 袋) |
E.coli O1 专一性引物 F | YW11-690f | 1 OD(B 袋) |
E.coli O1 专一性引物 R | YW11-690r | 1 OD(B 袋) |
E.coli O1 阳性对照,10E8 拷贝/uL | PC11-690 | 50 uL(C 袋) |
使用手册 | 11-690sc | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。E.coli O1 阳性对照浓度很高,所以收
到货后 E.coli O1 阳性对照需要分开放置,避免污染其他试剂和实验环境。
样品 DNA。
使用方法一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化 E.coli 的 DNA,也可以另购本公司的细菌 DNAout,此 产品跟本试剂盒兼容。
1. 按引物标签提示在装引物干粉的管中直接加入适量的超纯水(加入量见引 物试管上的标签),使得两条引物的浓度均为 10μM(10 pmol/μL),然 后各取 110μL 混合在一起得 220μL,标注为引物混合物,放冰上待用。 220μL 足够 100 次 PCR 反应。
2. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性 对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 E.coli O1 专一的 DNA片 段作为阳性对照。
使用本阳性对照时,由于其浓度较高,用前最好梯度稀释到 1000 拷贝
/uL。处理阳性对照时最好在专门的区域操作。一定要注意不要污染其他 试剂和成分。
三、设置 PCR 反应(40 uL 体系)
7. 根据样品数 N,设置 N+2 个 PCR 反应(一个是阳性对照,一个是阴性对 照)。在 N+2 个 PCR 管中分别加入下列成分
电泳检测 PCR 产物。本 PCR mix 含上样液,故不需要另外加上样液。 预期的 PCR 产物长度为 1090 bp。阳性对照应该出现 1090 bp 片段, 阴性对照不应该出现 1090 bp 片段,否则实验无效