产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50T | ￥ 3500 | 200 |
| 乙型肝炎病毒 cccDNA 荧光定量试剂盒共价闭合环状 DNA（covalently closed circularDNA，cccDNA） | |||||||||||||||||||||
| 是乙肝病毒前基因组 RNA 复制的原始模板，虽含量较少，每个肝细胞内只有约 | |||||||||||||||||||||
| 5～50 个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义， | |||||||||||||||||||||
| 只有清除了 cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态。因此 cccDNA 的 | |||||||||||||||||||||
| 检测具有重要的临床意义，本产品即是乙肝病毒 cccDNA 快速检测试剂盒。它 | |||||||||||||||||||||
| 具有下列特点： | |||||||||||||||||||||
| 1. 即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。 | |||||||||||||||||||||
| 2. 引物经过优化，特异性高。 | |||||||||||||||||||||
| 3. 荧光定量 PCR 检测，qPCR Mix 所含 SYBR Green I 只与双链 DNA 结合， | |||||||||||||||||||||
| 反应特异性强。 | |||||||||||||||||||||
| 4. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
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低温运输，-20℃保存，保存期限一年
一、样品 DNA 和引物的制备
用自选方法提取 HBV cccDNA。注意：病毒 DNA 纯化方法是决定检测灵 敏度的关键因素。如果不能很好纯化 HBV DNA，后面的 PCR 再灵敏也不 能提高整体检测灵敏度 。 在 引物管中加适量的 水使 引物 的 终浓度 为 10pmol/uL，即 10uM。
二、PCR 检测（30 μL 体系） 1. 在 PCR 管中加入下列成
| 自备 cccDNA 模板 | 1-5 μL | 无 | 无 |
| HBV cccDNA 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| 引物 14-10000f，10uM | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 引物 14-10000r，10uM | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 30 μL | ||
注：1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳 性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和 成分。最好在专门的区域操作。
2. 建议 PCR 反应参数（具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化）
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min |
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PCR 反应 （45 个循环） | 95℃ | 10 s |
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| 52℃ | 16 s |
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| 72℃ | 10 s |
