规格 | 价格 | 库存 |
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50T | ¥ 3500 | 200 |
牛腺病毒 3 型荧光定量 PCR 检测试剂盒牛血清的质量控制标准中有一项重要的指标是病毒的检测。比较常见的易感染奶牛和肉牛的病毒如 DNA 病毒:牛腺病毒 3 型(Bobine Adenovirus Type 3,BAV-3),主要引起牛的呼吸道和肠道疾病,其主要特征为肺炎、肠炎、结膜炎和多发性关节炎,是犊牛死亡的重要原因之一。其易感和潜伏性给畜牧业及其国际带来严重的经济损失,同时,给细胞培养以及相关基础研究带来一定的问题。因此,病毒的快速检测是控制牛血清质量的前提,除了传统的培养传代观察细胞病变,血清学诊断技术外,我们在这里引入荧光定量 PCR 的方法,来快速检测血清样品中是否污染有 BAV-3。本产品是根据 BAV-3 核酸序列的保守区 pol蛋白酶设计引物,定制的一种检测 BAV-3 的荧光定量 PCR 试剂盒。它具有下列
特点:
1.即开即用,用户只需要提供 DNA 模板即可使用。
2.快捷,整个 PCR 过程只要一小时。
3.灵敏度达达 100copies/reactlon 水平。
4.荧光 PCR mix 中含第二代饱和型荧光染料,效果好于 SYBR Green I。
5.密封体系,极大降低了假阳性。
本产品跟各种荧光 PCR 仪器兼容
成 份 | 编号 |
| 50 次塑料袋包装 |
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2×荧光 PCR Mix | 90408 |
| 1.5 mL |
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BAV-3 专一性引物一 | yw1277 |
| 100 uL |
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BAV-3 专一性引物二 | yw1278 |
| 100 uL |
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BAV-3 标准品 | yw12791280 |
| 40 uL |
(1.27×10E11 拷贝/uL) |
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DNA 稀释液 | 121206-10 |
| 10mL |
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超纯水 | 100935 |
| 1 mL |
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使用手册 |
| 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。
一、样品 DNA 的制备(本试剂盒不含所需试剂)
用自备试剂抽提病毒样品 DNA。注意:可以选用本公司的病毒 DNAout 或柱 式病毒 DNAout。
二、荧光 PCR 反应(25 uL 体系)
1. 配制标准品,用 DNA 稀释液将 BAV-3 标准品(1.27X10E11 拷贝/uL)稀
释到不同的浓度,每个浓度差 10 倍,共 8-10 个梯度。此标准品系列将用于 制作标准曲线。
2. 设置 PCR 反应:在 PCR 管中加入下列成分(N 取决于上步的稀释梯度由客 户自己决定):
成分 | 样品管 | 标准坪梯度 | 阴性对照 |
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| (共 8-10 管) |
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2×荧光 PCR Mix | 12.5 uL | 12.5 uL 每管 | 12.5 uL |
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待检测样品 DNA(自备) | 1-5 uL | 无 | 无 |
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标准品(8-10 个梯度) | 无 | N uL 每管 | 无 |
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BAV-3 专一性引物一 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
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BAV-3 专一性引物二 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
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补超纯水到 | 25 uL | 25 uL | 25 uL |
3. 上机进行荧光定量 PCR。荧光定量 PCR 反应参数如下(以 ABI7500 荧光定 量 PCR 仪为参考):
过程 | 温度 | 时间 |
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预变性 | 94℃ | 2 min |
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两步式 PCR 反应 | 94℃ | 30 s |
(40 个循环) |
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| 60℃ | 90 s |
4. 根据 8-10 管标准品的 Ct 值(x 轴)和浓度(y 轴)描出标准曲线,再根据 待测样品的 Ct 值技术按出样品的浓度。