产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50T | ￥ 2800 | 200 |
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA。
2. 根据鹿保守区域设计引物，能专一性地检测出样品中的鹿成分，包括马鹿、梅花鹿、坡鹿、水鹿和白唇鹿，但不能检测其他动物成分。
3. 荧光定量 PCR 检测，既可以定量，也可以定性，比常规PCR 更加灵敏和灵活。
4. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
5. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
6. 提供阳性标准品，便于分析实验结果。
7. 对混合样品中鹿成分的检测下限为 0.1%， 对样品中鹿成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
8. 本只能用于科研，足够 50 次 20μL 体系的荧光定量 PCR。
本产品参考国家标准 GB/T21106-2007 制备
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
| 2×qPCR MagicMix | 90408 | 0.5 mL（棕色） |
| 荧光PCR 专用模板稀释液 | 180701 | 1 mL（黄盖） |
| 鹿源性成分染料法PCR 引物混合液 | 14-112yw | 100 μL（白盖） |
| 鹿源性成分染料法PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 14-112pc | 50 μL（黄盖） |
| 核酸释放剂试用装 | 61202 | 20 次（1mL，绿盖） |
| 使用手册 | 13-510sc | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较
高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标
准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供动物样品做阳性对照，只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同）。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）
2. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照，6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的N+2 个样品，1 个用于PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照（用第 4 号阳性对照稀释液，浓度为 10000 拷贝/μL）。下面只描述定量分析的步骤， 定性分析只是把 6 个标曲反应缩减成 1 个，其余不变。
3. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕
后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加）
| 成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | 标准曲线 样品管（2-7 管） |
| 2×qPCR MagicMix | 各 10 μL | 10 μL | 各 10 μL |
| 鹿源型成分染料法PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| 自备 10×ROX (见注) | 各 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| N+2 个制备的 DNA 模板 | 各 6 μL | 不加 | 不加 |
| 超纯水 | 不加 | 6 μL | 不加 |
| 第 7 步所得标准曲线样品稀释液 （2-7 号） |
不加 |
不加 | 各 6μL（2 号样到 2 号管，3 号样到 3 号管…） |
注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用ROX 作为对照，其他荧光 PCR 仪器（如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，则用水替代。
盖上盖子后上机，按下面参数进行 qPCR（具体 PCR 参数可以根据 qPCR 仪器的不同而自行优化）。
五、数据处理
11. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。
12. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则
为阴性，如果小于 40，则为阳性。
