规格 | 价格 | 库存 |
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50T | ¥ 2500 | 200 |
猫疱疹病毒 1 型 PCR 试剂盒猫疱疹病毒 1 型(Feline Herpesvirus type 1,FHV-1)属于疱疹病毒科中的α-疱疹病毒,是猫病毒性鼻气管炎的病原,可引起猫及其他猫科动物 的眼病及呼吸道疾病。猫疱疹病毒会在结膜及上呼道上皮细胞内和神经元细胞内复制增殖,神经原的感染会导致终身潜伏感染。慢性潜伏感染是猫疱疹病毒急性感染后的典型结果,井且间歇性地再活化,排放病毒于口鼻分泌物及结膜分泌物。因此快速灵敏检测猫疱疹病毒 1 型具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猫疱疹病毒 1 型,与其他病毒没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
成份 | 编号 | 十孔盒包装 |
PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
猫疱疹病毒 1 型 PCR 引物混合物 | 13-61610yw | 100 μL(白盖) |
猫疱疹病毒 1 型 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) | 13-61610pc | 50 μL(黄盖) |
天净沙核酸释放剂 | 61202 | 20 次(1 mL,绿盖) |
使用手册 | 13-61610sc | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其
他试剂。
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20 次天净沙核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站天净沙核酸释放剂或产品编号 61202 下载。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 斑点叉尾鮰病毒 PCR 阳性对照的 1 万倍稀
释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA
放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分
成分 | N+2 个 样品管 | PCR 阴性 对照 | PCR 阳性 对照 |
PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
猫疱疹病毒 1 型 PCR 引 物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
PCR 阳性对照(猫疱疹病 毒 1 型 PCR 阳性对照的1 万倍稀释液) |
- |
- |
18 μL |
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) | 95℃ | 15 sec |
| 55℃ | 15 sec |
| 72℃ | 60 sec |
最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染