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产品特点:
本试剂盒是本公司通用型 LAMP 试剂盒的基础上开发的免 DNA 提取可视化 LAMP 试剂盒,它有下列特点:
1. 不需要专门提取 DNA,直接用细胞裂解将液进行 LAMP,极大缩短了实验。
2. 适用于病毒、细菌、真菌、植物、动物的各种形式的样品,包括实体组织、液体样品。
3. 使用 4×可视化 LAMP MagicMix,可视化肉眼检测实验结果。
4. 使用改良的 WarmStart Bst DNA 聚合酶,反应特异性更强。
5. 高扩增效率更高,扩增效率可达到 10E9-10E10,比 PCR 灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的 DNA 分子。
6. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的免 DNA 提取 LAMP 扩增。
7. 本产品只能用于科研目的。
运输及保存 :低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法
1. 配制免 DNA 提取溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足够 10 个样品)为例:在一干净塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超纯水,充分混合均匀即得 1mL 溶液 A 工作液。一次检测一个样品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL工作液足够 10 个样品。没用完的工作液可室温放置,但最好在一周内用完,不要长期放置。如果待测样品数量为其他数字,配制的溶液 A 工作液的体积需要做相应的调整。
2. 根据材料不同参考下表取少量样品到一干净的塑料离心管中。
注意:未列出样品,用户需要自己摸索最佳用量。对富含多醌多酚的植物材料(如棉花),组织使用量最好不要超过 0.5mg。
3. 加入 100uL 溶液 A 工作液,确保样品被溶液淹埋。
4. 95℃保温 10 分钟。
5. 待冷却到常温后加入 20uL 溶液 B 并混匀得细胞裂解液原液。放冰上待用。如果暂时不用,可以放-20℃长期保存。如果是第一次用本产品测试某实验材料时,不知道这些材料中有没有 LAMP 反应抑制剂,故建议取 10uL 细胞裂解液原液加 990uL 自备超
纯水得 100 倍细胞裂解液稀释液,再将 10uL 10 倍稀释液加 990uL 超纯水混匀得10000 倍稀释液。第一次测试时需测此三个浓度的样品,之后的实验可固定选一个对反应没有抑制的浓度进行实验。
6. 配制自备的 5×LAMP 引物混合液。先加超纯水(不要用 TE)将各引物干粉稀释到母液浓度,然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物和超纯水,最后得到1mL的 5×LAMP 引物混合液。如果需要配制的 5×LAMP 引物混合液体积大于或小于1mL,则各成分的用量请按比例调整。此混合液可以在-20℃放置 2 年