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cDNA 第二链合成试剂盒
产品名称:
cDNA 第二链合成试剂盒
英文名称:
cDNA 第二链合成试剂盒
产品类别:
科研试剂
产品编号:
Z131005
产品编号:
Z131005
  • CAS号 :Z131005
  • 存储条件:
    2-8℃
    纯度:
    -20℃
    [价格]
    规格 价格 库存
    50T ¥ 1380 200

    产品详情

     cDNA 第二链合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 杂合链中的 RNA 生切口,再用 DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进行RNA 链取代合成 cDNA 第二链,

    本产品具有下列特点:

    1. 即开即用,含有合成 cDNA 第二链的所有试剂包括 RNase HE.coli DNA聚合酶 1 DNA ligase

    2. 一管式操作,不需要每次进行纯化,不丢失宝贵样品。

    3. 所得双链 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCRreal-time PCRcDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

     

    本试剂盒足够 30  80uL 体系的 cDNA 第二连合成反应。

     

    成分

    编号

    十孔盒包装

    5×cDNA 第二链合成缓冲液

    131005a

    250 μL

    20×cDNA 第二链合成酶混合液

    131005b

    60 μL

    0.5 M EDTA 溶液

    130309

    60 μL

    超纯水

    100935

    1 mL

    使用手册

    131005sc

    1

     

    低温运输,-20保存,有效期一年

     

    cDNA 第一链合成试剂等

    一、合成 cDNA 第一条链

    本试剂盒不提供 cDNA 第一链合成试剂,用户需自备相关试剂合成 cDNA

    第一链。

    二、合成 cDNA 第二链

     

    1. 在冰浴上向 5uL 已经完成 cDNA 第一条链合成的反应体系逆转录体系 中依次加入下表试剂,如果多于 5uL,请只取用 5uL

    注:克隆双链 cDNA 一般需要平末端化,需要此步处理。PCRSSH 等后续处理一般不需要把双链 cDNA 平末端化,则可以跳过T4 DNA 聚合酶处理步骤, 直接用 EDTA 终止反应。

    1. 电泳 5 μL 检测 cDNA 质量。如果 cDNA  0.5-10Kb 的范围内呈模糊一片,则 cDNA 合格。如果没看见 cDNA 或有其他异常,需查找原因后再继续。

    2. 所得 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCRreal-time PCRcDNA 文库

     

    构建、抑制性差减杂交(SSH)等实验

     

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