规格 | 价格 | 库存 |
---|---|---|
50T | ¥ 1380 | 200 |
cDNA 第二链合成的原理是用 RNase H 使 RNA-DNA 杂合链中的 RNA 产生切口,再用 DNA Polymerase I 通过切口平移(nick translation)反应进行RNA 链取代合成 cDNA 第二链,
本产品具有下列特点:
1. 即开即用,含有合成 cDNA 第二链的所有试剂(包括 RNase H、E.coli DNA
2. 一管式操作,不需要每次进行纯化,不丢失宝贵的样品。
3. 所得双链 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、cDNA
本试剂盒足够 30 次 80uL 体系的 cDNA 第二连合成反应。
成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
5×cDNA 第二链合成缓冲液 | 131005a | 250 μL |
20×cDNA 第二链合成酶混合液 | 131005b | 60 μL |
0.5 M EDTA 溶液 | 130309 | 60 μL |
超纯水 | 100935 | 1 mL |
使用手册 | 131005sc | 1 份 |
低温运输,-20℃保存,有效期一年
cDNA 第一链合成试剂等
一、合成 cDNA 第一条链
本试剂盒不提供 cDNA 第一链合成试剂,用户需自备相关试剂合成 cDNA
第一链。
二、合成 cDNA 第二链
1. 在冰浴上向 5uL 已经完成 cDNA 第一条链合成的反应体系(逆转录体系) 中依次加入下表试剂,如果多于 5uL,请只取用 5uL:
注:克隆双链 cDNA 一般需要平末端化,需要此步处理。PCR、SSH 等后续处理一般不需要把双链 cDNA 平末端化,则可以跳过T4 DNA 聚合酶处理步骤, 直接用 EDTA 终止反应。
1. 电泳 5 μL 检测 cDNA 质量。如果 cDNA 在 0.5-10Kb 的范围内呈模糊一片,则 cDNA 合格。如果没看见 cDNA 或有其他异常,需查找原因后再继续。
2. 所得 cDNA 可以直接用于后续的常规 PCR、real-time PCR、cDNA 文库
构建、抑制性差减杂交(SSH)等实验