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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 100T | ￥ 300 | 1 |
| 300T | ￥ 480 | 2 |
植物总糖和还原糖检测试剂盒（DNS微板法）
产品简介：
植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质形状，常以糖含量作为重要指标，单糖和某
雅吉生物植物总糖和还原糖检测试剂盒（DNS微板法）检测原理是还原糖在碱性加热条
的含量。
产品组成：
| 名称(编号：YC0698) | 100T | 300T | 存储 |
| 试剂(A)：Glu标准(1mg/ml)） | 1ml | 1ml | 4℃ |
| 试剂(B)：DNS检测液 | 10ml | 30ml | RT避光 |
| 试剂(C）：显色液（总糖使用） | 5ml | 10ml | RT避光 |
自备材料：
1、蒸馏水、盐酸溶液、氢氧化钠溶液
2、50ml离心管、1ml离心管、离心机、水浴锅或恒温箱、酶标仪、96孔板、水浴锅
操作步骤(仅供参考)：
1、还原糖的提取：
①称取植物样品0.5~3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次，洗出液也转移至该容器。
②50°℃水浴30min，并不时搅拌，以便还原糖彻底浸出。
③将沉淀和浸出液转移至 50ml离心管，4000g 离心 5min。留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸馏水，混匀，再次4000g 离心5min。
③留取上清液，将2次获得的上清液合并，用蒸馏水定容至100ml(提取液)，混匀，作为还原糖待测液。
2、总糖的水解和提取：
①称取植物样品05~3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次，洗出液也转移至该容器。向容器中加入10ml6M盐酸溶液，揽拌均匀，然后置于沸水浴中加热水解30min,并不时搅拌。
③取2滴滴加于载玻片上，滴加1滴显色液(约50u)，检查水解是否完全，如已经水解完全，则不显示蓝色，
④水解完毕后，冷却至室温，加入6M氢氧化钠溶液，使溶液pH至7.4，用蒸馏水定容至100ml，混匀，4000g离心5min或过滤。
②取上清或滤液10ml，用蒸馏水定容至100ml，成稀释10倍的总糖水解液（提取液）取50ul总糖水解液，测定其还原糖的含量，
3、稀释葡萄糖标准：取干净离心管或试管，按下表操作，依次获得系列浓度的Glu标准。
| 加入物（ml） | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Glu标准（1mg/ml） | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 |
| 蒸馏水 | 0.04 | 0.03 | 0.02 | 0.01 | 0 |
| 标准葡萄糖浓度（mg/ml） | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 |
4、加样:取1m商心管，按下表设百空自乳、标维孔、测定孔,溶液应按朋顺序依次加入并注免产生气如品中的过高可以品适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2-3平行孔，求平均值。
| 加入物（μl） | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
| 蒸馏水 | 50 | —— | —— |
| 系列Glu标准（1~5号） | —— | 50 | —— |
| 提取液 | —— | —— | 50 |
| DNS检测液 | 100 | 100 | 100 |
| 沸水浴中准确煮沸5min，取出，自来水冷却至室温。补加蒸馏水250μl | |||
5、还原糖测定混匀，依次抽取300ul转移至相应96孔板中，以空白孔调零，测定540nm处标准孔、测定孔的吸光度。
计算：以系列Glu标准（1~5号)，即标准葡萄糖浓度（mg/ml）为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标，作图得标准曲线，根据提取液的吸光度在标准曲线上查出相应的葡萄糖浓度。
还原糖的百分含量：
100g样品中还原糖含量（g）=（c×VT）/（m×1000）×100=（c×VT）/(m×10)
总糖的百分含量：
100g样品中总糖含量（g）=（c×N×VT）/(m×1000)×100×0.9=（c×N×VT）/(m×10)×0.9
式中：c=从标准曲线查的糖量(mg/ml)
VT=提取液的总体积（ml）=100
m=植物样品的质量（g）
N=总糖水解液的稀释倍数=10
注意事项：
1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、待测样品如不能及时测定，应置于2~8°C保存，3天内稳定。
3、如果样品还原糖浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
4、总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用，×0.9是为了从测定出的总糖水解成单糖中，扣除水解时所消耗的水量。
5、6M盐酸配制：一般市售的浓盐酸为11.6~12M，用蒸馏水或去离子水与浓盐酸1：1混合即配制成6M，盐酸溶于水会放热，应小心操作，避免伤人。
6、6M氢氧化钠配制：氢氧化钠24g溶解于蒸馏水或去离子水，补至100ml，氢氧化钠溶于水会放热，应小心操作，避免伤人。
7、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
有效期： 12个月有效，室温运输，按要求保存。
