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土壤碱性蛋白酶(Solid-Alcalase Protease,S-ALPT)试剂盒
产品名称:
土壤碱性蛋白酶(Solid-Alcalase Protease,S-ALPT)试剂盒
英文名称:
Solid-Alcalase Protease,S-ALPT
产品编号:
YS910
产品类别:
分光法检测盒
检测方法:
发光法
检测样本:
血清
保质期:
一年
[价格]
规格 价格 库存
50管/24样 ¥ 880 200
100管/48样 ¥ 1800 200

产品详情

土壤碱性蛋白酶(Solid-Alcalase Protease,S-ALPT)试剂盒正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在碱性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理:

碱性条件下,S-ALPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备:

可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水

试剂组成和配置:

试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10ml蒸馏水充分溶解待用;剩余试剂4℃保存;

试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入100uL试剂七使粉剂润湿,然后加入20ml试剂一,转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存;

试剂四: 粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入50ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4

保存;

试剂五:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

试剂六:液体 1.5mL×1 支,0.05mg/ml标准酪氨酸溶液;

试剂七:液体 1.5mL×1 支,4℃保存;

测定操作:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。

2、试剂二、三和四40℃水浴10min

3、样本测定:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.02

0.02

试剂一(μL

100

300

试剂三(μL

200

 

混匀后,40℃水浴 30min,振荡 5-6 次,使土样与反应液充分接触

试剂二(μL

100

100

混匀,8000g 25℃离心 10min,取上清液

 

测定管

对照管

标准管

上清液(μL

150

150

 

试剂六(μL

 

 

150

试剂四(μL

700

700

700

试剂五(μL

150

150

150

混匀,40℃水浴 20min680nm下读取各管吸光值A

注意 标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

S-ALPT 活性计算:

单位定义:每天每 g 土样中产生1mg酪氨酸为一个S-ALPT活力单位。

S-ALPT(mg/d/g)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=48×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管

 

C 标准管:标准管浓度,0.05mg/mLV 反总:反应体系总体积,0.4mLT:反应时间,30min=1/48dW:样本质量,0.02g

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