上海细胞库
人源细胞系| 稳转细胞系| 基因敲除株| 基因点突变细胞株| 基因过表达细胞株| 重组细胞系| 猪的细胞系| 马细胞系| 兔的细胞系| 犬的细胞系| 山羊的细胞系| 鱼的细胞系| 猴的细胞系| 仓鼠的细胞系| 狗的细胞系| 牛的细胞| 大鼠细胞系| 小鼠细胞系| 其他细胞系|
人源细胞系| 稳转细胞系| 基因敲除株| 基因点突变细胞株| 基因过表达细胞株| 重组细胞系| 猪的细胞系| 马细胞系| 兔的细胞系| 犬的细胞系| 山羊的细胞系| 鱼的细胞系| 猴的细胞系| 仓鼠的细胞系| 狗的细胞系| 牛的细胞| 大鼠细胞系| 小鼠细胞系| 其他细胞系|
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| T25 | ￥ 2600 | 200 |
| Synonyms: | HCC44人非小细胞肺癌细胞 |
| Background: | established from the lung of a 54-year-old woman with non-small cell lung cancer of the adenocarcinoma type |
| Species: | human (Homo sapiens) |
| Tissue: | N/A |
| Disease: | non-small cell lung carcinoma |
| Gender: | N/A |
| Morphology: | adherent epitheloid cells growing as monolayer; |
| Growth Mode: | N/A |
| Doubling Time: | ca. 30 hours |
| DNA Profile: | N/A Cell Line Authentication Service |
| Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS We strongly suggest to purchase the complete medium |
| Cryopreservation medium: | 90%FBS+10%DMSO |
| Mycoplasma: | contamination was eliminated with sparfloxacin, then negative in microbiological culture and PCR assays |
| Immunology: | cytokeratin +, cytokeratin-7 +, cytokeratin-8 +, cytokeratin-17 +, cytokeratin-18 +, cytokeratin-19 +, desmin -, endothel -, EpCAM +, GFAP -, neurofilament -, vimentin + |
| Fingerprint: | multiplex PCR of minisatellite markers revealed a unique DNA profile |
| Species: | confirmed as human by cytogenetics |
| Cytogenetics: | human flat-moded hyperpentaploid karyotype with 8% polyploidy - 120-124<5n>XX, +1, +1, +3, +3, -4, -4, -5, +7, +7, +7, -9, -9, -10, +11, -18, -21, -21, +22, +22, +22, +7-14mar, der(1)t(X;1)(q11;p11)x2, del(1)(q21)x2, i(1q), t(1;3)(p11;q11), add(2)(q?11), del(2)(p11), add(3)(q28), add(3)(p11), i(5p), add(8)(p2?), add(8)(q2?), add(8)(q24), der(9;19)(q10;q10)x2, add(10)(q2?5), add(11)(p13), der(11)add(11)(p1?1)add(11)(q25), add(12)(p13), add(16)(p11), add(17)(p1?2), add(18)(p11), del(20)(q12)x1-2, add(20)(q13)x2 - 2-6 dmin present in 80% cells |
| Virus | PCR: EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-I/II -, MLV -, SMRV - |
| 传代方法 | 第一次建议1:2传代 | 冻存条件 | 细胞库无血清冻存液 |
| 细胞描述 | 该细胞系培养所用基础培养基为 DMEM/F12,配置完全培养基时需加入 10%FBS, 10ng/mL EGF，1%Anti-Anti 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 | ||
| 培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 | ||
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用将细胞置于含有5%CO 的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入PBS清洗一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心
5. 将细胞置于含有5%
传代比例：建议 1:2 （以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
