上海细胞库
人源细胞系| 稳转细胞系| 基因敲除株| 基因点突变细胞株| 基因过表达细胞株| 重组细胞系| 猪的细胞系| 马细胞系| 兔的细胞系| 犬的细胞系| 山羊的细胞系| 鱼的细胞系| 猴的细胞系| 仓鼠的细胞系| 狗的细胞系| 牛的细胞| 大鼠细胞系| 小鼠细胞系| 其他细胞系|
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| T25 | ￥ 2600 | 200 |
| Synonyms: | EPLC-272HEPLC-272H（人肺癌鳞癌细胞） |
| Background: | established from a surgical lung specimen of a 57-year-old Caucasian man who underwent surgery for undifferentiated squamous cell carcinoma of the lung (without having received prior radiation or chemotherapy) in 1986 |
| Species: | human (Homo sapiens) |
| Tissue: | lung |
| Disease: | epidermoid lung carcinoma |
| Morphology: | adherent epithelial-like cells (without sharp contours) growing adherently as monolayers |
| Doubling Time: | ca. 60 hours |
| DNA Profile: | N/A Cell Line Authentication Service |
| Culture Medium: | RPMI-1640+20%FBS We strongly suggest to purchase the complete medium |
| Cryopreservation medium: | 90%FBS+10%DMSO |
| Mycoplasma: | negative in DAPI, microbiological culture, RNA hybridization assays |
| Immunology: | cytokeratin +, cytokeratin-7 -, cytokeratin-8 +, cytokeratin-17 +, cytokeratin-18 +, desmin -, endothel -, EpCAM +, GFAP -, neurofilament -, vimentin + |
| Fingerprint: | multiplex PCR of minisatellite markers revealed a unique DNA profile |
| Species: | confirmed as human with IEF of AST, LDH, MDH |
| Cytogenetics: | human hypotriploid karyotype with 12% polyploidy - 66(59-70)<3n>XX, -Y, -4, +7, +8, -18, -19, -20, -21, +6mar, add(1)(p32), del(2)(q33), der(2;11)(q10;q10), add(3)(p25), i(5p), i(5q), add(6)(q11), add(7)(q33)x2-3, add(7)(p15), del(8)(p12-21), del(10)(p14)x1-2, add(11)(q24)x2, add(12)(p11-12), add(13)(q33), add(14)(p12), i(15q), der(17)t(3;17)(p11;p12), add(19)(q13), add(21)(p12), dmx2 - matches published karyotype |
| Virus | ELISA: reverse transcriptase negative; PCR: EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HPV -, HTLV-I/II -, MLV -, SMRV - |
| 传代方法 | 第一次建议1:2传代 | 冻存条件 | 细胞库无血清冻存液 |
| 细胞描述 | 该细胞系培养所用基础培养基为 DMEM/F12,配置完全培养基时需加入 10%FBS, 10ng/mL EGF，1%Anti-Anti 本库的细胞仅用于科研工作，未经许可不得用于其他目的，使用者不得将本库细胞转让给第三者。 | ||
| 培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基，留作过渡培养 | ||
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。
冻存细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用将细胞置于含有5%CO 的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入PBS清洗一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm2培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心
5. 将细胞置于含有5%
传代比例：建议 1:2 （以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
