使用前请先在漂洗液 WB 中加入无水乙醇。 1、取三片 3×3mm 的干血斑样品到 1.5ml 的离心管（自备）中。 2、加入 200µl 的 DNA LysisI。 3、加入 20µl 蛋白酶 K 溶液，涡旋震荡 10 sec 钟混匀后，放入预热至 56℃的恒温震荡器 中，900 rpm 恒温震荡 1 小时。 4、短暂离心，加入 200µl 的结合液 CB，震荡 10 sec 钟充分混匀。将离心管放入预热至 70℃的恒温震荡器中，900rpm 恒温震荡 10 min。孵育结束后简短离心以去除管盖内 壁的液滴。 注意: 加入结合液 CB 时可能会产生白色沉淀，一般 70℃放置时会消失，不会影响后 续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取 DNA 量少和提取出 的 DNA 不纯。 5、加入 100µl 的无水乙醇。如果室温超过 25℃，请将乙醇置冰上预冷。轻轻颠倒混匀 样品，室温放置 5 min，简短离心以去除管盖内壁的液滴。 6、将上一步所得溶液都加到一个吸附柱 AC 中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm 离 心 30 sec，弃收集管废液，将吸附柱 AC 放回收集管中。 7、向吸附柱 AC 中加入 500µl 抑制物去除剂 IR，12.000rpm 离心 30 sec，弃收集管废液， 将吸附柱 AC 放回收集管中。 8、向吸附柱 AC 中加入 700µl 漂洗液 WB（使用前请先检查是否已加入无水乙醇）， 12,000rpm 离心 30 sec，弃收集管废液，将吸附柱 AC 放回收集管中。 9、向吸附柱 AC 中加入 500µl 漂洗液 WB，12,000rpm 离心 30 sec，弃收集管废液。 10、将吸附柱 AC 放回废液收集管中，12,000rpm 离心 2 min，倒掉废液。将吸附柱 AC 置于室温放置 2-5 min,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后 续的酶反应（酶切、PCR 等）实验。 11、将吸附柱 AC 转入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加 20-50µl 洗脱 缓冲液 EB，室温放置 2-5 min，12,000rpm 离心 2 min，将溶液收集到离心管中。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 20μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组 DNA 的得率，可将离心得到的 DNA 溶液再次加入吸附柱 AC 中，室温放置 2 min， 12,000rpm(~13,400×g)离心 2 min。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用水 做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内(可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围)， pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率；且 DNA 产物应保存在-20℃，以防 DNA 降解。
