规格 | 价格 | 库存 |
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100T/48样 | ¥ 350 | 10 |
腺苷脱氨酶(ADA)测试盒说明书
一、测定原理:
腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)催化腺嘌呤核苷水解,产生次黄嘌呤核苷和氨,然后对产生的氨进行显色,从而可以计算血清 ADA 的活性。
二、试剂组成及配制(100 管/48 样):
试剂一:粉剂×6 支,稀释液 5ml×6 瓶,4℃保存,临用前 2 小时每支粉剂用 1 瓶稀释液溶解。
[注]:需充分混匀完全溶解,否则会影响结果。配好后4C保存48小时。
试剂二:粉剂×2 支,稀释液 100ml×2 瓶,临用时每支粉剂用 1 瓶稀释液溶解即成,4℃避光
保存。
试剂三:贮备液 2ml×2 瓶,稀释液 100ml×2 瓶。临用时每瓶贮备液用 1 瓶稀释液稀释
即成,4℃避光保存,可稳定两个月。
试剂四:1mg 氨氮/ml 标准贮备液 1ml×1 瓶,4℃保存。
25µg 氨氮/ml 标准应用液的配制:取 1mg 氨氮/ml 标准贮备液 0.25ml 用双蒸水定容至 10ml,充分混匀,现用现配。
三、操作表:
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
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双蒸水(ml) | 0.02 |
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25µg 氨氮/ml 标准液(ml) |
| 0.02 |
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样本(ml) |
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| 0.02 | 0.02 |
试剂一(ml) | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
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混匀,37℃准确反应 60 分钟 |
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试剂二(ml) | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
试剂一(ml) |
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| 0.25 |
试剂三(ml) | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
混匀,37℃水浴 30 分钟后,室温静置 10 分钟,波长 640nm,1㎝光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。
【注】本试剂盒可测定10%组织匀紫中的ADA. 但是显色后需3500转/分钟,离心10分钟后才能进行比色
四、单位定义与计算公式:
(一)、血清中 ADA 酶活性的计算:
1、单位定义:1ml 血清在 37℃和底物作用 60 分钟产生 1µg 氨氮为一个酶活性单位。
(二)、组织匀浆中 ADA 酶活性的计算:
1、单位定义:每毫克组织蛋白在 37℃和底物作用 60 分钟产生 1µg 氨氮为一个酶活性单位。
五.测定意义
ADA广泛分布于各组织中,以盲肠、小肠粘膜和脾中含量最高,肝中含量仅为小肠的7%~14%,肝脏中90%在细胞质中,细胞核含量低,但却是胞核中有关核酸代谢酶中含量最高的一个。
在肝脏疾病中,ADA 活性增高。阻塞性黄疸时此酶活性一般不升高, 而在肝实质性损伤时,此酶和ALT同时升高,故有助于鉴别。在慢性活动性肝炎和肝硬化时ALT阳性率较低,而ADA阳性率可达90%左右,增高较明显。