滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)是近几年发展起来的一种核酸恒温扩增方法。以环状DNA为模板,通过一个短的DNA引物(与部分环状模板互补),在phi29 DNA 聚合酶催化下将dNTPs转变成单链DNA,此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。这种方法不仅可以直接扩增DNA和RNA,还可以实现对靶核酸的信号放大,灵敏度达到一个拷贝的核酸分子,因此在核酸检测中具有很大的应用价值和潜力。 因其高灵敏度、高特异性和可操作性,RCA技术在基础研究、实际检测、医疗诊断及纳米材料等方面都有很好的应用,结合细胞原位检测、单核苷酸多态性SNPs,蛋白质分析、免疫芯片和全基因组的扩增等研究都能发挥其巨大的优势。
本滚环扩增试剂盒配备的phi29 DNA聚合酶具有链置换和连续合成特性,可连续合成长达70kb的DNA片段。另外,该酶具有3’→5’外切酶校读功能,合成的DNA片段保真性高。试剂盒配备的Random Hexamers为6碱基随机引物可对目标分子进行指数放大(通常放大10000倍)。
主要特征
高灵敏度:单引物RCA的扩增效率成指数扩大,可达104-105。
操作简单:恒温扩增,程序简单化。
仪器简单:只需维持恒温的水浴锅。
应用广泛:可广泛应用于基础研究和医疗诊断等领域。
储存 :-20℃可保存3年,避免反复冻融。
功能测试:如下图