蜡样芽孢杆菌显色培养基是改良的培养基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。改进型显色剂和添加剂,特异性和灵敏度明显提高。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落周围有一不透明环,其它菌显蓝绿色、黄色或无色,革兰氏阴性菌被抑制。
成分(g/L)
特殊营养物质 20.0 显色剂 0.5 4.0 琼脂 15.0 pH 7.0±0.2 25℃ 蜡样芽孢杆菌添加剂 3.0g(已配套,无需另购) 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
抑菌剂
用法
称取基础培养基 7.95g,加入 180ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取 0.6g 蜡样芽孢杆菌添加剂,加入 20ml 无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动 5-10min,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌 15min。冷至 45-50℃左右时,把蜡样芽孢杆菌添加剂加入基础培养基中, 轻轻混匀,倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 1-2mm,这样有利观察不透明环。
操作步骤
1、按 GB 标准、SN 标准、FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、样品液在 30±1℃ 增菌培养 18-24 小时;
3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上,36±1℃ 培养 18~24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落周围有一不透明环。若 24 小时没有出现典型菌落,可延长培养至 48 小时;
4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃ 培养 18-24 小时,挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈不透明无色固体培养基。
2、微生物试验
在 36±1℃ 培养 18~24h 小时:
质控菌株 | 菌株号 | 生长情况 | 菌落颜色 |
蜡样芽孢杆菌 | CMCC63303 | +++ | 深蓝色且菌落周围有一圈不透明环 |
蜡样芽孢杆菌 | ATCC11778 | +++ | 蓝绿色,菌落比较大,扁平,且菌落周围有一圈不透明环 |
枯草芽孢杆菌 | CMCC63501 | ++ | 白色,菌落周围没有不透明环 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | -/+ | 白色 |
大肠杆菌 | ATCC25922 | - | 白色 |
方法的局限性
本培养基鉴定蜡样芽孢杆菌,有时可能会出现假阳性,需做其它补充试验。苏云金芽孢杆菌在本培养基上显色与蜡样芽孢杆菌相同,但食品中一般很少。
典型特征
蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色,菌落周围有一不透明环
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。