一、概要
维生素B12作为痕量元素,生物上属于重要的螯合物膜剂,由含钴的卟啉环作为中心原子组成,钴是由4个氮原子、一个氢和一个二甲基苯并咪唑组成。维生素B12,为稳定的复合物,在胃酸里一种所谓的内源因子帮助下,被小肠下部分吸收。维生素B12缺乏会导致恶性贫血,这种疾病不是由于维生素B12供给不足,而是因为缺乏内源因子。恶性贫血者可服用高剂量的维生素B12。
现有的检测程序主要是微生物方法(1),但也有高效液相色谱法和薄层色谱法,这些需要高量的时间和仪器。
本检测试剂盒定量检测维生素食品(2)中的维生素B12,要比传统的微生物分析法(24-48小时)更快,包含样品预处理只需2.5-4个小时。
二、检测原理
维生素B12定量测试基于酶联免疫吸收分析原理。针对维生素B12的抗体约束在酶标板上。样品维生素B12和维生素B12过氧化物酶结合物加到酶标板孔中。标记的酶和游离维生素B12竞争抗体结合位点。在室温下培育一小时后,用稀释的洗涤液洗孔,去掉未结合物。加入培养基溶液,培育20分钟,变成蓝色。加入停止液抑制颜色发展,颜色变成了黄色,ELISA读数器测量黄色,维生素B12浓度间接的和测试样品颜色强度成比例。