产品说明:
由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶的研究。本品仅用于科研。
产品内容:
操作方法:
1、细菌可溶性蛋白的提取
1) 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的蛋白酶抑制剂和 PMSF;混匀,放置在冰 上备用;
2) 将菌体湿重称重,然后按照比例(1g:10ml)加入的新配置的裂解液,混匀, 过程注意冰上操作;
3) 将混匀液移入超声仪中,超声,
超声条件:总时间 45min,超声时间 3s,间隔时间 3s,过程为冰浴环境;
超声结束,4 度离心,10000rpm/min 20min;
2、吸取上清至新的管中,进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
注意事项:
1. 实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
2. PSMF(有毒)现用现加,因为 PMSF 在水溶液中会快速降解;