产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
phACE2-promoter-TA-luc (报告基因质粒)自行研发的用于检测人血管紧张素转化酶2 (Angiotensin converting enzyme2，ACE2)的promoter转录活性水平的报告基因质粒。
phACE2-promoter-TA-luc是以pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了human ACE2的启动子序列(1970bp)，可以高灵敏度地检测human ACE2 promoter的激活水平。
ACE2是SARS冠状病毒(SARS-CoV和SARS-CoV-2)和人类呼吸道冠状病毒NL63的受体。SARS-CoV/SARS-CoV-2通过其Spike蛋白受体结合域(Receptor binding domain，RBD)与ACE2的肽酶结构域结合，参与病毒的感染过程。SARS-CoV-2 Spike蛋白与ACE2的亲和力是SARS-CoV Spike蛋白与ACE2的亲和力的10-20倍。
有报道干扰素(Interferon)可以上调ACE2的转录水平，从而可能促进相关病毒感染。
ACE2是肾素-血管紧张素系统(Rennin-angiotension system，RAS)的重要成员。血管紧张素(Angiotensin II，Ang II)是RAS系统的主要效应分子，具有促进内皮细胞凋亡和促进炎症因子表达的作用。ACE2主要是通过降解血管紧张素II生成血管紧张素1-7(angiotensin-(1-7))从而发挥机体保护功能。ACE2是在肺、心脏、肾脏和肠中表达的I型膜蛋白，其胞外域包括N端肽酶结构域(Peptidase domain，PD)及C端Collectrin-like结构域(CLD)。
pGL6-TA是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
phACE2-promoter-TA-luc质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| human ACE2 promoter | 20-1989 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 2002-2024 |
| luc2 reporter gene | 2056-3718 |
| SV40 late poly(A) signal | 3753-3974 |
| SV40 early enhancer/promoter | 4022-4440 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region | 4465-5259 |
| Synthetic poly(A) signal | 5284-5332 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 5399-5418 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 5656 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 6447-7307 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 7412-7565 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 7514-7533 |
phACE2-promoter-TA-luc质粒(7565bp)的图谱如下：
phACE2-promoter-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut phACE2-promoter-TA-luc)包括：
| AatII | AclI | AflII | AscI | AsiSI | BglII | BmgBI |
| BmtI | BsiWI | BspEI | BssHII | CspCI | EcoRV | MluI |
| NdeI | NheI | NruI | PacI | PaeR7I | PflMI | PmeI |
| PspXI | RsrII | SbfI | SmaI | SnaBI | SrfI | SwaI |
| TspMI | XcmI | XhoI | XmaI | XmnI | ZraI |
phACE2-promoter-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut phACE2-promoter-TA-luc once)包括：
| Acc65I | G`GTAC,C | 14 | Eco53kI | GAG|CTC | 780 |
| AflIII | A`CRYG,T | 5598 | EcoNI | CCTNN`N,NNAGG | 4939 |
| AhdI | GACNN,N`NNGTC | 6519 | HindIII | A`AGCT,T | 1900 |
| ApaLI | G`TGCA,C | 5912 | KpnI | G,GTAC`C | 18 |
| AseI | AT`TA,AT | 1545 | MfeI | C`AATT,G | 3892 |
| BaeI | ,(N)5`(N)1ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` | 4665 | NotI | GC`GGCC,GC | 6418 |
| BamHI | G`GATC,C | 3985 | PciI | A`CATG,T | 5598 |
| BciVI | GTATCC(N)5,N` | 5800 | PflFI | GACN`N,NGTC | 1390 |
| BglI | GCCN,NNN`NGGC | 5 | PmlI | CAC|GTG | 920 |
| BsaAI | YAC|GTR | 920 | PstI | C,TGCA`G | 6438 |
| BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 1189 | PvuI | CG,AT`CG | 6890 |
| BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 1147 | SacI | G,AGCT`C | 782 |
| BsrGI | T`GTAC,A | 2556 | SacII | CC,GC`GG | 6914 |
| BstBI | TT`CG,AA | 5334 | SalI | G`TCGA,C | 5348 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 6445 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 5 |
| BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 6438 | SpeI | A`CTAG,T | 7349 |
| BstZ17I | GTA|TAC | 7030 | StuI | AGG|CCT | 4418 |
| Bsu36I | CC`TNA,GG | 6876 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 1390 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 3209 |
phACE2-promoter-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
RVprimer3 (7514-7533):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
phACE2-promoter-TA-luc的全序列信息:D2488 phACE2-promoter-TA-luc全序列.txt。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2488-1µg | phACE2-promoter-TA-luc | 1μg |
| D2488-100µg | phACE2-promoter-TA-luc | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1.首次使用1µg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.以phACE2-promoter-TA-luc质粒用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
