规格 | 价格 | 库存 |
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5次 | ¥ 490 | 200 |
本产品是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成,可用下面的示意图表示
本产品在上述原理的基础上本产品的特点是:
1. 使用十聚引物,复性效率比六聚引物更高。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
3. 快速,最快1小时即可完成标记反应。
4. 所得DNA探针比活性高(对同位素可以达到109 cpm/ μg DNA),检测灵敏度高。
5. 所需模板DNA量少(只需要10 ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100 bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400 nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 三种标记选择,其中90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记,但需自备标记底物;90603B和90603C可分别用于生物素和地高辛标记。
使用及效果
将10ng-3 μg的DNA模板在水(终体积不超过14 μL)中变性5分钟后放冰上, 加入2 μL 10×标记缓冲液、1 μL Klenow exo-酶、1 μL 标记核苷酸(A型中不提供),混合后37℃保温1-20小时,加入1 μL自备的0.5M EDTA终止反应。所得标记探针可以直接使用或者放-20℃长期保存。