产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 5次 | ￥ 290 | 200 |
| 10次 | ￥ 550 | 200 |
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理， 再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，全套操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100 mL过夜培养的菌液纯化得到高达300-500 μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280=1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
1. 快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2. 离心柱最大吸附量为500 μg，100mL高拷贝的菌液一般能得到700 μg左右的质粒DNA，100 mL低拷贝的菌液一般能得到150-350 μg质粒DNA。
3. 纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。
4. 产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。
5. 用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。
6. 价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。
使用及效果
收集50-100 mL过夜培养饱和菌液，离心弃上清后用6 mL溶液A重悬沉淀，再与6 mL溶液B混匀，再加入8 mL溶液C，混匀，室温静止2分钟，离心10分钟， 将上清转移到DNA纯化柱中，静置2分钟，离心后弃收集管中的废液，用10 mL的通用洗柱液洗涤离心柱两次。干甩一次，将离心柱置于新的50 mL离心管（自备）中，用1 mL DNA洗脱液洗脱2-5次即得质粒DNA。
图注：高拷贝质粒pWXL001从70 mL过夜培养菌液中提取得到。从左到右分别为第一次，第二次，第三次，第四次和第五次洗脱，每次洗脱体积均为1 mL。上样体积为10 μL，最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为绿如蓝染料，电泳缓冲液为超快电泳液。第一次洗脱约25% 的质粒DNA，第二次洗脱约35%的质粒DNA；第三次洗脱约20%的质粒DNA；第四次洗脱约10%的质粒DNA；第五次洗脱约8%的质粒DNA。本次实验质粒DNA产量是465.5 μg，产率是6.65 μg/mL(实验编号305095)。
