本试剂盒是用于革氏阳性细菌(G+)质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。G+菌 |
体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快 |
速提取质粒DNA,全套操作可以在30分钟之内完成。其操作流程如下: |
使用本试剂盒可从1-5 mL过夜培养的菌液纯化得到高达20 μg的高纯度质粒 |
DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。 |
1. 快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。 |
2. 不需要预平衡离心吸附柱。 |
3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。 |
4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。 |
5. 产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。 |
6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。 |
7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。 |
将0.1-1.5 mL过夜培养的G+12000-15000 g室温离心1分钟后, 重悬于0.6 mL |
溶G+菌液中,颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟。12000-15000 g室温离 |
心10分钟,小心弃上清。用和0.25 mL溶液A重悬沉淀,再与0.25 mL溶液B混匀, |
再加入0.35 mL溶液C,混匀,室温静止2分钟,离心10分钟,将上清转移到DNA |
纯化柱中,静置2分钟,离心1分钟,弃收集管中的废液,加入0.5 mL的通用洗柱 |
液,离心1分钟,弃废液,重复上一步1次。离心1分钟,甩干残留液体,将DNA纯 |
化柱置于新的1.5 mL离心管(自备)中,加入适量(30—100 μL)DNA洗脱液离 |
心即得质粒DNA。 |