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线状DNA清除剂
产品名称:
线状DNA清除剂
英文名称:
Linear DNA Erasol
产品类别:
科研试剂
产品编号:
221182
产品编号:
221182
  • CAS号 :221182
  • 保质期:
    1年
    [价格]
    规格 价格 库存
    50T ¥ 1980 1

    产品详情

    线状DNA清除剂(酶法)

    Linear DNA Erasol

     

    产品及特点

    分离纯化环状DNA(质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA)的时候经常需要去除其中的线状DNA污染,而保留共价闭合环状DNA和带nick切口和gap缺口的环状DNA。本公产品就是为满足此需求而开发,它有下列特点:

    1. 即开即用,不需用户花费大量时间去摸索各种条件。

    2. 酶法去除线性DNA,专一性强,可以使线状DNA污染降级几个数量级,不会干扰后续试验。

    3. 不降解有nick和gap的环状DNA,包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA。

    4. 处理不依赖于DNA序列,可降解任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。

    5. 得到的环状DNA可用于多种后续试验,尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。

    6. 本产品足够30 mL体系使用50次。

    7. 本产品只能用于科研。

     

     

    规格及成分

    本产品采用五孔盒包装

    成分

    编号

    规格

    包装

    线状DNA清除剂溶液A

    221182a

    100 mL

    0.5 mL绿盖管

    线状DNA清除剂溶液B

    221182b

    30 mL

    0.5 mL红盖管

    微量核酸沉淀剂

    220313

    1.8 mL

    2 mL白盖管

    使用手册

    221182sc

    1份

     

     

     

    运输及保存

    低温运输,-20℃保存,有效期一年。

     

     

    自备试剂

    超纯水75%乙醇

     

     

    使用方法

    1. 在干净塑料离心管中,按下表加入各成分(30 mL体系):

    成份

    样品

    阳性对照

    阴性对照

    DNA(1-2 mg)

    自备样品DNA

    自备环状DNA

    自备线状DNA

    线状DNA清除剂溶液A

    3 mL

    3 mL

    3 mL

    线状DNA清除剂溶液B

    1 mL

    1 mL

    1 mL

    自备超纯水

    补到30 mL

    补到30 mL

    补到30 mL

    2. PCR仪器上37℃保温16小时。如果使用水浴或者金属浴,则需要在管中加入200 mL自备石蜡油以防止水分蒸发。注意:保温时间过短可能会形成短的DNA片段,影响后续反应,所以最好保温16小时。。

    3. 65℃加热10分钟灭活相关酶。

    4. 反应液可以直接用于后续的测序和PCR检测。如果需要纯化,则将30 mL酶反应溶液转移到一个新的1.5 mL离心管中,再加入60 mL微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油,则直接在30 mL酶反应溶液中加入60 mL微量核酸沉淀剂。注意:微量核酸沉淀剂有沉淀,取用前需要充分摇匀。

    5. 室温15000×g离心10分钟。

    6. 弃上清后加自备的75%乙醇1 mL,振荡混匀。

    7. 15000×g离心3分钟,弃上清。

    8. 再短暂离心后小心吸弃上清,沉淀即为回收的去除掉线状DNA之后的DNA沉淀(含共价闭合环状DNA和带nick和gap的环状DNA),可溶于自备超纯水中后直接使用或放-20℃冰箱长期保存。

     

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