上海细胞库
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 50T | ￥ 1200 | 10 |
真菌DNA提取试剂盒（真菌DNAOUT）：本产品是真菌基因组DNA柱式提取试剂盒，可以用于真菌基因组DNA的快速提取。真菌DNA提取是一个难题，一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态，二是因为其细胞壁一般都很厚，比较难以破碎。本产品专门用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取DNA。它具有如下特点：
1. 即开即用，提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 既可以采取液氮研磨法破裂真菌，也可用玻璃珠法破碎真菌，两种方法均属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援真菌DNA（注：文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌DNA污染，用于提取真菌DNA往往会造成污染）。
3. 本方法提取一个样品只需要30分钟，方便、快速和高效。
4. 一次可以处理5 mL的过夜真菌培养物，所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右，长度一般在20 kb左右，每毫升菌液的DNA产率一般在1-3μg。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
5. 不会发生离心柱堵塞现象。
6. 本产品足够50次微量纯化。
7. 本产品只能用于科研。
真菌DNA提取试剂盒（真菌DNAOUT）使用方法：
1. 收集菌体或孢子:
1.1、 对菌液：取3-5 mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的
1.2、 对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落（约50 mg塑料离心管中，12000 ×g 离心2分钟弃上清留菌体沉淀。），
1.3、 对孢子材料，一般取0.1 g转移到装有1mL自备无菌水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000 ×g离心2分钟弃上清留菌体沉淀。左右，直接加入到塑料离心管中，然后进入下分钟弃上清留菌体沉淀。此步用于洗涤菌体。一步操作。
3.在上述真菌材料中加入自备的无菌水1 mL，振荡半分钟后12000 ×g离心2
裂解真菌：
3.1、 液氮研磨：在研钵中液氮研磨上述真菌材料成粉，然后转移到干净的离心管中，在离心管中加入500 μL真菌DNA提取溶液A，常温涡旋震荡3分钟。
3.2、 玻璃珠破碎法：在没有液氮的条件下，采用此法。在菌体沉淀中加入500离心2分钟，将透明的上清液全部转移到一个5 mL的干净的塑料离心管中。不要取下层的液体。
5. 在上清中加入3倍体积的真菌DNA提取溶液CμL真菌DNA提取溶液A和0.5克的酸洗玻璃珠，常温涡旋震荡10分钟。
4. 在离心管中加入500 μL真菌DNA提取溶液B，涡旋震荡3分钟，12000 ×g，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置2分钟，然后12000 ×g离心1分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。
6. 在离心吸附柱中加入500 μL通用洗柱液，12000 ×g离心1分钟，倒掉穿透液。此步可以洗涤掉杂质。
7. 重复上步操作一次。
8. 12000 ×g空柱离心1分钟。
9. 加入50-100 μLDNA洗脱液（基因组提取专用），室温放置1分钟以上，12000×g离心1分钟，穿透液即为真菌DNA样品。
10.为了得到更多的DNA样品，可以重复上步操作1-2次。
11.所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。
真菌DNA提取试剂盒（真菌DNAOUT）
运输及保存： 常温运输及保存，保存期为一年。
自备试剂 无菌水
