产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
pRD29B-luc(植物报告基因质粒)是自行研发的植物(如拟南芥等)原生质体瞬时转染萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因质粒。质粒为氨苄青霉素抗性。
pRD29B-luc载体中Luciferase基因由RD29B诱导型启动子驱动表达。RD29B为拟南芥在脱水，低温或高盐条件下诱导表达的基因，其编码的亲水性蛋白可以提高植物在以上逆境条件下的耐性。RD29B promoter是目前常用的逆境诱导型启动子，在脱落酸(Abscisic Acid，ABA)(ST1751)诱导的情况下，luciferase的表达水平可以大大增强。如果由花椰菜花叶病毒35S(CaMV35S)组成型强启动子启动GUS基因的表达，会增加植物的代谢负担，造成大量物质和能量的浪费，并进而影响植物正常的生长发育；而RD29B promoter启动子不仅可以高效启动下游基因的表达，也可以比较好的规避CaMV35S的缺点。
pRD29B-luc中RD29B promoter的上下游有数个酶切位点，可利用其对RD29B promoter进行其它启动子的替换，用以研究感兴趣的启动子的功能。
pRD29B-luc载体仅保留植物瞬时转化所需元件，结构精简，避免由于载体过大导致原生质体转化效率降低。此载体不可用于植物稳定遗传株系的构建。
pRD29B-luc采用来自根瘤农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(nopaline synthase terminator，NOS-T)，用于终止RNA聚合酶转录，对目的基因的表达进行调控。
pRD29B-luc质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| Ampicillin resistance ORF | 137-997 |
| Ampicillin promoter | 998-1102 |
| M13 forward primer(M13 fwd) | 1576-1592 |
| RD29B promoter | 1646-2226 |
| Luciferase | 2229-3881 |
| NOS terminator | 4036-4288 |
| M13 reverse primer(M13 rev) | 4307-4323 |
| lac operator | 4331-4347 |
| lac promoter | 4355-4385 |
| CAP binding site | 4400-4421 |
| pUC origin | 4709-5297 |
pRD29B-luc质粒(5479bp)的图谱如下：
pRD29B-luc的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2489 pRD29B-luc(植物报告基因质粒).pdf
pRD29B-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRD29B-luc)包括：
| Acc65I | AccI | AfeI | AgeI | AleI | ApaI | AscI |
| AsiSI | AvrII | BaeI | BbvCI | BclI | BlpI | BmtI |
| Bpu10I | BsgI | BsmI | BstXI | BstZ17I | EagI | FseI |
| HpaI | KpnI | MluI | MscI | NaeI | NgoMIV | NheI |
| NotI | NruI | PaeR7I | PflFI | PflMI | PmeI | PmlI |
| PshAI | PspOMI | PspXI | RsrII | SacII | SalI | SexAI |
| SfiI | SmaI | SnaBI | SpeI | SrfI | StuI | SwaI |
| TspMI | Tth111I | XhoI | XmaI |
pRD29B-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRD29B-luc once)包括：
| AatII | G,ACGT`C | 1128 | DraIII | CAC,NNN`GTG | 1884 |
| AflII | A`CRYG,T | 4065 | EcoNI | CCTNN`N,NNAGG | 3846 |
| AhdI | GACNN,N`NNGTC | 211 | EcoRV | GAT|ATC | 3567 |
| AlwNI | CAG,NNN`CTG | 5061 | HincII | GTY|RAC | 3533 |
| AvaI | C`YCGR,G | 3285 | HindIII | A`AGCT,T | 1597 |
| BamHI | G`GATC,C | 1622 | NcoI | C`CATG,G | 2228 |
| BfuAI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 3627 | NmeAIII | GCCGAG(N)19,NN` | 357 |
| BglII | A`GATC,T | 4285 | NsiI | A,TGCA`T | 4152 |
| BmgBI | CAC|GTC | 2030 | PacI | TTA,AT`TAA | 3551 |
| BsaBI | GATNN|NNATC | 4099 | PpuMI | RG`GWC,CY | 3408 |
| BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 272 | PsiI | TTA|TAA | 2554 |
| BseRI | GAGGAG(N)8,NN` | 3782 | PstI | C,TGCA`G | 1613 |
| BsoBI | C`YCGR,G | 3285 | SbfI | CC,TGCA`GG | 1608 |
| BspMI | ACCTGCNNNN`NNNN, | 3627 | ScaI | AGT|ACT | 691 |
| BsrGI | T`GTAC,A | 2719 | SgrAI | CR`CCGG,YG | 3657 |
| BstAPI | GCAN,NNN`NTGC | 1379 | StyI | C`CWWG,G | 2227 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 2837 | XcmI | CCANNNN,N`NNNNTGG | 2963 |
| Bsu36I | CC`TNA,GG | 2842 | XmnI | GAANN|NNTTC | 809 |
| BtgI | C`CRYG,G | 2227 | ZraI | GAC|GTC | 1130 |
| CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 1904 |
pRD29B-luc质粒可使用的测序引物序列如下：
M13 forward primer(1576-1592): 5’-GTAAAACGACGGCCAGT-3’
luc promoter primer(2558-2274): 5’-GATAGAATGGCGCCGGG-3’
pRD29B-luc的全序列信息：D2489 pRD29B-luc.txt
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2489-1µg | pRD29B-luc | 1μg |
| D2489-100µg | pRD29B-luc | 100μg |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1.首次使用1µg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl，共1ml。可以直接用于酶切，用于拟南芥原生质体转化需进行质粒大量抽提。
