Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针,活细胞用)，也称MitoTracker Red CMXRos for Live Cell，是一种具有细胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine，简称CMXRos)，能够特异性地标记细胞中具有生物活性的线粒体，检测线粒体膜电位。由于纯度等原因，本探针只适合活细胞染色，不兼容后续的细胞固定和通透，染色后再固定和通透，荧光强度会明显下降，甚至消失。

本产品是一种氧化型的红色荧光染料，只需简单地和细胞孵育，即可通过被动运输穿过细胞膜，并借助本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基(mildly thiol-reactive chloromethyl)官能团特异性地标记有生物活性的线粒体。
Mito-Tracker Red CMXRos分子式为C32H32Cl2N2O，分子量为531.5，CAS number为167095-09-2，Mito-Tracker Red CMXRos呈红色荧光，最大激发波长为579nm，最大发射波长为599nm。Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱以及结构式参考图1。

图1. Mito-Tracker Red CMXRos的激发光谱和发射光谱(A)以及结构式(B)。

Mito-Tracker Red CMXRos可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似，Mito-Tracker Red CMXRos对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位，因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色，不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。使用Mito-Tracker Red CMXRos染色活细胞线粒体效果参考图2。

图2. Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用)染色肾小管上皮细胞线粒体的效果。左侧图为明场下肾小管上皮细胞形态图；蓝色荧光为Hoechst 33342染色(C1027/C1028/C1029 Hoechst 33342活细胞染色液(100X))的细胞核，红色荧光为Mito-Tracker Red CMXRos染色的线粒体，右侧为Hoechst 33342和Mito-Tracker Red CMXRos双染的肾小管上皮细胞的细胞核与线粒体。实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
由于Mito-Tracker Red CMXRos在线粒体内的聚集依赖于线粒体的膜电位，因此本产品也可以作为线粒体膜电位的指示探针，通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
按最终工作浓度为50-200nM计算，本产品小包装C1049-50µg可以配制约500-2000ml Mito-Tracker Red CMXRos工作液；中包装C1049-250µg可以配制的体积为小包装C1049-50µg的5倍。
包装清单：

保存条件：
-20℃避光保存，一年有效。
注意事项：
Mito-Tracker Red CMXRos (活细胞用)可以用于活细胞的线粒体荧光染色，不适合用于固定后细胞或者组织的染色，也不兼容活细胞的线粒体荧光染色后的细胞固定和通透，染色后再固定和通透，荧光强度会明显下降，甚至消失。
本产品仅包含非常微量的粉末，使用前请先离心数秒钟，使微量粉末充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
使用本产品可以在常见的多孔板或培养皿中进行荧光染色，也可以在盖玻片或载玻片上进行荧光染色。
本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.Mito-Tracker Red CMXRos储存液的配制：
取一管50μg Mito-Tracker Red CMXRos粉末加入470μl的无水DMSO (anhydrous dimethylsulfoxide)，充分溶解后，得到浓度为200μM的Mito-Tracker Red CMXRos储存液。也可以根据需要配制成其它浓度的储存液，如1mM。适当分装后避光保存于-20℃或更低温度。
2.Mito-Tracker Red CMXRos工作液的配制：
a.取少量200μM Mito-Tracker Red CMXRos储存液按照1:1000-1:10,000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中，使最终浓度为20nM-200nM。例如取1µl 200μM的Mito-Tracker Red CMXRos储存液加入到1ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中，混匀后即为200nM的Mito-Tracker Red CMXRos工作液。如果染色的细胞后续需要进行固定或通透等步骤，建议工作浓度为50nM-200nM。Hanks' Balanced Salt Solution (with Ca2+ & Mg2+) (C0219)可以向雅吉订购。
b.Mito-Tracker Red CMXRos工作液使用前需37℃预温育。
注：Mito-Tracker Red CMXRos工作液的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低非特异性荧光染色和线粒体毒性，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Red CMXRos。
3.贴壁细胞的线粒体染色：
a.当细胞在细胞培养板或培养皿中培养至一定密度时，去除细胞培养液，加入步骤2中配制好的Mito-Tracker Red CMXRos工作液，37℃孵育15-30分钟。注：最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.去除Mito-Tracker Red CMXRos工作液，加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜或荧光酶标仪进行观察或检测。此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Mito-Tracker Red CMXRos工作液浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。
注：标记的Mito-Tracker Red CMXRos易淬灭，请注意尽快进行拍照等荧光检测。也可以通过降低荧光显微镜的激发光强度(即汞灯或LED光源)或适当降低Mito-Tracker Red CMXRos工作液浓度以延缓淬灭。
4.悬浮细胞的线粒体染色：
a.1000×g离心5分钟，弃上清，用37℃预热的Mito-Tracker Red CMXRos工作液轻轻重悬细胞，37℃孵育15-30分钟。注：最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.孵育结束后，1000g离心5分钟，弃上清，加入37℃预温育的新鲜细胞培养液重悬细胞。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行观察、分析或检测。
注：如果需要在载玻片或盖玻片上固定悬浮细胞，可先用雅吉的Poly-D-lysine/多聚赖氨酸(ST508)处理载玻片或盖玻片。​