产品分类/PRODUCT CLASSIFICATION
本产品是基于荧光探针检测的即用型PCR 试剂盒，可以对靶片段进行实时定量PCR 分析（quantitative PCR、qPCR）。产品含有经过优化的缓冲液组分、热启动 Taq DNA 聚合酶、Taq DNA 稳定剂、dNTPs、MgCl2 和稳定剂等所有实时定量PCR 所需要的成分，用户只需加入基因组DNA 或cDNA 模板、引物和探针即可进行探针法实时定量PCR 反应，具有广泛的用途。本产品具有下列特点：
1. 以2×Mix 提供，用户只需准备模板、引物、探针和ROX 染料（取决于qPCR 仪器）即可以进行探针法实时定量PCR 实验，非常方便快捷，降低了操作误差。
2. 各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。灵敏度时可以达到50 拷贝/反应（跟模板质量，引物设计等相关）。
3. 既可用于 TaqMan 探针 qPCR，也可以是分子信标（molecular beacon）探针 qPCR。
4. 灵敏度和专一性比染料法荧光定量PCR 更高。
5. 可用于基因表达分析、SNP 分析、拷贝数分析等实验。也可以用于定性检测。
6. 本产品只能用于科研，1mL 足够 100 次 20uL 体系的探针法 qPCR 反应。
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自备阳性对照模板（6 各梯度）
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不加
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各 1 uL（各 加 1 个梯度）
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不加
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阴性对照模板（一般用水）
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不加
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不加
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1 uL
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自备探针（0.5uM）
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各 1 uL
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各 1 uL
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1 uL
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自备 50×自备 ROX I 或 ROX II 染料（见注）
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各 0.4 uL
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各 0.4 uL
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0.4 uL
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补超纯水到
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20 uL
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20 uL
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20 uL
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注，下列信息仅供参考，具体以 qPCR 仪器的使用手册为准。 1、不需要 ROX 的机型：Agilent MX3000 和 MX4000、iCycler IQ、LightCycler 480、，、 Smart Cycler System、Thermal Cycler Dice Real Time System 等型号的荧光 PCR 仪器不需要加 ROX 染料，但加入的话也不会影响整个 PCR 分析。 2、需要使用 ROX I 的机型：ABI Prism7000、7300、7700、7900HT、Step One、 Step One Plus。 3、需要使用 ROX II 的机型：ABI Prism7500、7500 Fast、MJ Opticon、MJ Chromo4、 Corbett RotorGene 3000。 2. 放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 下表的扩增参数仅供参考，一定需要根据靶分子长度，引物和探针的 Tm 值、标记染料的种类等进行调节。一般选择三步法 PCR： 如果引物 Tm 值接近 60℃，也可以选择两步法 PCR： 3. 数据处理 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。
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| 如果把2X 探针法qPCR Mix TaqMan探针法荧光定量PCR试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性。一般情况下，阴性对照 Ct 大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性，如果小 于 40，则为阳性。
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染料法 qPCR MagicMix |
