本产品具有下列特点:
1. 即开即用,提供纯化所需要的所有溶液和介质,不需要单独准备每种试剂, 免去用户自己摸索条件。
2. 适用于 PCR 标记、随机引物标记、切口平移和填入法标记。
3. 能去掉绝大部分的未标记物、盐离子等小分子。
4. 足够 10 次纯化使用,每次可以纯化 50 uL 的标记反应液。
5. 可用于 DIG、生物素、Cy3、Cy5 等非同位素标记的 DNA 和 RNA 探针
(由于标记分子带非极性基团,容易进入有机相,因此这些探针不能用传 统的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法纯化)。
成份 | 编号 | 10 次小纸盒包装 |
Sephadex G50 介质 | 121115A | 15 mL |
0.7 mL 离心柱及管套 | 121115B | 10 套 |
TE 溶液 | 80934 | 10 mL |
使用手册 | 1 份 |
注意:由于非同位素标记的探针浓度一般都比较低,非常容易吸附到枪头或离心管的表面,造成探针的损失,因此最好使用硅化的离心管和枪头。
1. 摇晃 Sephadex G50 介质至均匀,迅速转移 0.5 mL 到离心柱中,套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm 室温离心 1 分钟,Sephadex G50 介质将压紧在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,再加 0.5mL 的摇晃后得到的 Sephadex G50 介质,2000rpm 室温离心 1 分钟。
4. 经上述步骤会得到体积约为 0.5mL 压紧后的 Sephadex G50 介质。如不足,再加入少量的 G50 介质离心,直到体积达到 0.5 mL 左右。倒掉套管中的穿透液。
5. 在柱子中 Sephadex G50 界面的上面加入 50 uL TE 缓冲液,套上套管, 2000rpm 室温离心 1 分钟,测量收集管中穿透液的体积。
6. 重复上步 3-5 次,直到收集管中穿透液的体积跟加入的体积一样(50 uL)。
7. 将 50 uL 的标记探针(必须使用 50 uL 样品。如果没有 50 uL,需要用TE 缓冲液或水补足到 50 uL)加到柱子中 Sephadex G50 界面的上面, 套上一个自备的(最好是硅化的)离心管。
8. 2000rpm 室温离心 1 分钟,离心管中的穿透液将含标记探针,未参入的标记物将滞留在介质中。
电泳或点杂交检测探针回收效率后直接使用或放-20℃长期保存