1. 可以回收 20 nt 以上的 RNA。
2. 操作简单快速,只需要 5 分钟。
3. 回收率高达 80%以上。
4. 一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
5. 得到的 RNA 纯度一般都在 1.9 以上,可以用于各种后续实验。
1. 在 RNA 溶液中加入 9 倍体积的柱式 RNA 纯化溶液 A,颠倒数次充分混匀。注意:如果在 1.5mL 塑料离心管中操作,RNA 溶液的体积不要超过 150uL,否则加入 9
倍体积的溶液 A 后,体积不够。另外,由于会因为非特异性吸附等原因,整个操作会丢失一定量的 RNA,所以 RNA 的起始总量不能低于 5ug。如果低于 5ug 最好加
入 5ug 的载体 RNA(如酵母 tRNA 等)。
2. 根据最后体积多少分一次或两次上柱,即将混合液转移到离心吸附柱中。每次转移后 12000 g 室温离心半分钟并保留穿透液(待确认 RNA 回收成功后再弃之)。
3. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 g 室温离心半分钟并弃穿透液。
4. 再加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 g 室温离心半分钟并弃穿透液。
5. 干甩半分钟,即将空离心吸附柱和套管 12000 g 室温离心半分钟。
6. 加 30-100 uL RNA 洗脱液到离心吸附柱中,12000 g 室温离心半分钟即得回收的RNA。