上海细胞库
人源细胞系| 稳转细胞系| 基因敲除株| 基因点突变细胞株| 基因过表达细胞株| 重组细胞系| 猪的细胞系| 马细胞系| 兔的细胞系| 犬的细胞系| 山羊的细胞系| 鱼的细胞系| 猴的细胞系| 仓鼠的细胞系| 狗的细胞系| 牛的细胞| 大鼠细胞系| 小鼠细胞系| 其他细胞系|
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| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 5 x 10^5 cells/vial | ￥ 8800 | 1 |
| 细胞名称 | 人视网膜周细胞-永生化 |
| 货号 | YS0878 |
| 种属 | 人 |
| 组织来源 | 视网膜 |
| 永生化方法 | 转入 Sv40 |
| 生长方式 | 贴壁 |
| 安全性 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护 |
|
人视网膜周细胞培养 | 培养基：DMEM 高糖+10%胎牛血清+1%双抗 |
| 配套培养基：（YS-120） | |
| 温度：37℃ | |
| 气相：95%空气，5%二氧化碳 | |
|
人视网膜周细胞传代 | 收到细胞后，请对细胞培养瓶外表进行消毒，将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓 |
| 冲，待细胞恢复基本生长状态后，进行后续细胞实验。 | |
| 在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况： | |
| （一）细胞未长至 85%时，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内，严格无 | |
| 菌操作，打开细胞培养瓶，若培养瓶上无特殊标注，吸去剩余培养液，只留 6-8ml培 | |
| 养液继续培养。 | |
| （二）细胞已长满（达 85-95%）。即可进行传代，具体步骤如下： | |
| 1.弃去培养液，用 PBS 洗涤 1-2 次， | |
| 2.加入 1.0ml 胰酶消化液，37℃消化，显微镜下观察细胞消化情况，若细胞回缩变圆、 | |
| 透亮、轻拍甁壁呈流沙样脱落，则迅速拿回操作台，加入双倍的含 10%血清的完全培 | |
| 养液，终止消化并轻轻吹打细胞，使其变成单细胞悬液， | |
| 3.将细胞收集于离心管中离心 1000rmp/5min，弃上清，轻弹管底，将细胞弹散， | |
| 4.加入新鲜培养液重悬细胞，进行传代、冻存， | |
| 5.如果没有特别说明，建议收到细胞后的第一次传代比例为 1:2。 | |
| 注：1.观察细胞密度最好用（4X物镜）低倍镜观察，以便正确的判断细胞密度；观 | |
| 察细胞形态请用（10X 或 20X）高倍镜观察； | |
| 2.瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养； | |
| 3.有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心重悬后接种到新瓶内； | |
| 4.收到细胞后，若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染，请及时与我们联系。 | |
| 人视网膜周细胞保存 | 冻存条件：70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 | 仅供研究之用 |
| 常见问题 | 1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师 |
| 及 | 解决。 2.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 8-10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 85-95%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁， 将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我 们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。。 |
| 解决方案 | |
