规格 | 价格 | 库存 |
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5 x 10^5 cells/vial | ¥ 8800 | 1 |
细胞名称 | 人视网膜周细胞-永生化 |
货号 | YS0878 |
种属 | 人 |
组织来源 | 视网膜 |
永生化方法 | 转入 Sv40 和 hTERT 基因 |
生长方式 | 贴壁 |
安全性 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护 |
人视网膜周细胞培养 | 培养基:DMEM 高糖+10%胎牛血清+1%双抗 |
配套培养基:(YS-120) | |
温度:37℃ | |
气相:95%空气,5%二氧化碳 | |
人视网膜周细胞传代 | 收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓 |
冲,待细胞恢复基本生长状态后,进行后续细胞实验。 | |
在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况: | |
(一)细胞未长至 85%时,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无 | |
菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,吸去剩余培养液,只留 6-8ml培 | |
养液继续培养。 | |
(二)细胞已长满(达 85-95%)。即可进行传代,具体步骤如下: | |
1.弃去培养液,用 PBS 洗涤 1-2 次, | |
2.加入 1.0ml 胰酶消化液,37℃消化,显微镜下观察细胞消化情况,若细胞回缩变圆、 | |
透亮、轻拍甁壁呈流沙样脱落,则迅速拿回操作台,加入双倍的含 10%血清的完全培 | |
养液,终止消化并轻轻吹打细胞,使其变成单细胞悬液, | |
3.将细胞收集于离心管中离心 1000rmp/5min,弃上清,轻弹管底,将细胞弹散, | |
4.加入新鲜培养液重悬细胞,进行传代、冻存, | |
5.如果没有特别说明,建议收到细胞后的第一次传代比例为 1:2。 | |
注:1.观察细胞密度最好用(4X物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观 | |
察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察; | |
2.瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养; | |
3.有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心重悬后接种到新瓶内; | |
4.收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们联系。 | |
人视网膜周细胞保存 | 冻存条件:70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO 保存条件:液氮存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题 | 1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师 |
及 | 解决。 2.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 8-10ml 培养液培养观察,细胞生长至汇合度 85-95%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁, 将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我 们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。。 |
解决方案 | |