广义上来说,凡是细胞培养体系中的外来成分或成分变化,都应视为污染,细胞污染不能完全被消除,但能减少其发生的频率和后果的严重性。细胞污染根据污染源主要可以分为物理性,化学性和生物性污染。
支原体污染:支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物,约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性,可为圆形、丝状或梨形,在光境下不易看清内部结构。多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6—8.0),对酸耐受性差,对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。支原体污染细胞后,培养液一般不发生混浊,多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解,因此易被忽视。但个别严重情况,可致细胞增殖缓慢,甚至从培养器皿脱落。如何确定是否有支原体污染,一般可用培养法或荧光染色法检测,市场上有多种支原体检测的试剂盒,本人试用过几种,先达基因(gendx.cn)的ERA法支原体快速检测试剂盒还不错,两步操作,20min出结果,灵敏度较高、速度比较快、操作简单灵敏,可检出的支原体覆盖范围非常比较广,超过130(亚)种。