规格 | 价格 | 库存 |
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T25 | ¥ 1500 | 1 |
细胞来源
JCRB
细胞检测
细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
传代方法
建议1:2-1:3 两天换液一次
备注
该细胞已通过STR。
组织来源:口腔(Oral cavity)
疾病:舌鳞状细胞癌(Tongue squamous cell carcinoma)
年龄:69岁(69 years)
培养体系:该细胞系培养所用基本培养基为 DMEM/F12,配置完全培养基时需加入 10%FBS,1%Anti-Anti。
建议同时购买完培,同时购买非常优惠
细胞收到后处理:
收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快和我们联系。如包装完好,取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常,细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时,以稳定细胞状态。
细胞培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。