藕淀粉源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒新产品推荐可用于检测藕淀粉源性成分.现代食品加工工艺极大改变了食材原有的味 道 气味 色泽 纹理和质地等特性,因此传统的感官鉴别技术已经无法对食材的真伪 进行准确的鉴定.同时部分食材还有致敏性,因此基于基因检测的快速灵敏的食材来源 检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障.本产品是根据探针法荧光定量 PCR 原理 开发的藕淀粉源性成分检测试剂盒,它具有下列特点：

1.   即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板.

2.   引物等组分经过优化,灵敏度高.

3.   提供阳性对照,便于区分假阴性样品.

4.   特异性高,引物是根据藕淀粉源性成分 DNA 序列高度保守区设计,不会跟其他 生物样本的 DNA 发生交叉反应.

5.   既可用于定性检测,又可用于定量检测.用于定量检测时线性范围至少为5 个数 量级.

6.   本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应.

7.   本产品只能用于科研.

成分规格

保存条件

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年.阳性对照需要单独放置,不要污染其他试 剂.

藕淀粉源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒新产品推荐使用方法

一 DNA 提取（样本制备区）

1.  （选做）如果有 N 个样品待提取,最好设置 N+2 个提取,多出的是 PC（样品制 备阳性对照）和 NC（样品制备阴性对照）.可以取阳性对照的 1000 倍稀释液 10μL 再加 上一定量的水,使总体积与待提取样品的规定体积一致,以此作为 PC .另外用水作为  NC.

2.  用自选方法提取纯化样品 DNA ,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容.

二 稀释标准曲线样品（样本制备区）

（由于阳性对照浓度高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,避免污染样 品或本试剂盒的其他成分）.

1.    标记 6 个离心管,分别为 7 ,6 ,5 ,4 ,3 ,2.

2.    用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光模板稀释液,（最好用带芯枪头,下同）.

3.    在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL  的阳性对照（试剂盒提供） ,充分震荡 1 分钟, 得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品.放冰上待用.

4.    换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL  的阳性对照（上步稀释所得） ,充分震 荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品.放冰上待用.

5.    换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL  的阳性对照（上步稀释所得） ,充分震 荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品.放冰上待用.

6.    重复上面的操作直到得到6 个稀释度的标准曲线样品.放冰上待用. 若无需制作标准曲线,将阳性对照稀释到 1×10E5 拷贝/μL 即可.

三 试剂配制（试剂准备区）

准备足量的 qPCR 管（待检样品 阴性对照 阳性对照） ,向各 qPCR 管中分别加入下 列成分.

转移至样本准备区.

四 添加模板（模板添加区）

向 qPCR 管中分别加入 5 ul 模板,顺序为阴性对照（DEPC-H2O） 待测样品模板 藕淀粉源性成分 qPCR 阳性对照,离心 30 秒,立即进行扩增反应.