全蛋白提取试剂盒
有效期：1 年.
产品组成：
| 名称 | 50T | 100T | 储存条件 |
| 裂解液（强） | 50 ml | 100 ml | 2-8 ℃ |
| 磷酸酶抑制剂（100×） | 0.5ml | 1ml |
-20℃ |
| 蛋白酶抑制剂（100×） | 0.5ml | 1ml | |
| PMSF（100×） | 0.5ml | 1ml |
产品说明：
本试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究.本品仅用于科研.
操作方法：
1 组织总蛋白的提取
1） 在 1ml 的冷裂解液中各加入 10ul 的磷酸酶抑制剂 蛋白酶抑制剂和 PMSF；混匀,放置在冰上备用；
2） 称取 0.1g 的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入 0.5-1ml 的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作；
3） 将组织匀浆液移入 1.5ml 的 EP 管中,4 ℃ 12000g 离心 30min；
4） 吸取上清至新的管中；
5） 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验.
（提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存.）
2 细胞总蛋白的提取
1） 裂解液的用量：107 个细胞需要裂解液 1ml；
2） 贴壁细胞：弃去培养基,用冷的 PBS 洗两次,弃去 PBS,然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,将刮离的细胞裂解液移入 EP 管中,颠倒裂解 20-30min.
3） 悬浮细胞：4℃ 400g 离心收集细胞,用冷的 PBS 洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,涡旋
10s,放置冰上裂解 10min,重复 3-4 次；
全蛋白提取试剂盒裂解完毕之后,将细胞裂解液 4 ℃12000g 离心 30min；
5） 将上清移入新的 EP 管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验.
（提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存.）
注意事项：
1. 实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境.
2. PSMF（有毒）现用现加,因为 PMSF 在水溶液中会快速降解.
全蛋白提取试剂盒
