C57小鼠巨噬细胞永生化培养方法

点击次数:38次     发布时间:2025/3/20 10:01:32

 

一、细胞背景

C57小鼠巨噬细胞永生化细胞是一种来源于C57BL/6小鼠的巨噬细胞系,经过永生化处理,具有稳定的增殖能力和巨噬细胞特性。巨噬细胞是免疫系统的重要组成部分,参与炎症反应、病原体清除、组织修复和免疫调节等过程。该细胞系广泛应用于免疫学、炎症研究、肿瘤微环境及药物筛选等领域。

供应商:雅吉生物
雅吉生物是一家专注于细胞培养、细胞鉴定及细胞相关产品研发的高科技企业。我们提供高质量的细胞系、培养基及相关试剂,并配备专业的技术支持团队,确保客户在细胞培养和实验过程中获得最佳体验。


二、鉴定情况

为确保细胞系的正确性,需进行以下鉴定:

  1. 形态学鉴定

    • C57小鼠巨噬细胞永生化细胞呈圆形或不规则形,贴壁或半悬浮生长,具有典型的巨噬细胞形态。

  2. 表面标志物检测

    • 通过流式细胞术检测巨噬细胞标志物(如F4/80、CD11b)的表达。

  3. 功能鉴定

    • 通过吞噬实验、细胞因子分泌实验(如TNF-α、IL-6)验证细胞的功能性。

  4. STR profiling

    • 通过短串联重复序列(STR)分析,确认细胞系的特异性。


三、研究方向和意义

  1. 免疫学研究

    • 研究巨噬细胞在先天免疫和适应性免疫中的作用。

    • 探索巨噬细胞在炎症反应和免疫调节中的机制。

  2. 炎症与感染研究

    • 用于研究病原体感染过程中巨噬细胞的吞噬和清除功能。

    • 探索炎症性疾病(如类风湿性关节炎、炎症性肠病)的发病机制。

  3. 肿瘤微环境研究

    • 研究巨噬细胞在肿瘤微环境中的作用及其对肿瘤进展的影响。

    • 探索肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的极化机制及其在免疫治疗中的应用。

  4. 药物筛选与毒理学研究

    • 用于评估药物对巨噬细胞功能(如吞噬、细胞因子分泌)的影响。

    • 研究化学物质或环境毒素对巨噬细胞的毒性作用。


四、文献参考

  • 可根据具体实验需求,提供相关文献支持。


五、细胞复苏和冻存步骤

1. 细胞复苏
  • 从液氮中取出冻存的C57小鼠巨噬细胞永生化细胞,迅速放入37°C水浴中解冻。

  • 将细胞悬液转移至15 mL离心管中,加入5 mL预热的完全培养基(RPMI 1640 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin)。

  • 轻轻混匀,1000 rpm离心5分钟,弃上清。

  • 用新鲜培养基重悬细胞,转移至T25培养瓶中,置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

2. 细胞冻存
  • 收集对数生长期的细胞,1000 rpm离心5分钟,弃上清。

  • 用冻存液(90% FBS + 10% DMSO)重悬细胞,调整细胞密度至5×10⁶ cells/mL。

  • 分装至冻存管中,逐步降温至-80°C,24小时后转移至液氮中长期保存。


六、注意事项

  1. 培养基

    • 使用RPMI 1640培养基,添加10% FBS和1% Penicillin-Streptomycin。

    • 培养基需定期更换,避免营养耗尽。

  2. 细胞密度

    • 保持细胞密度在5×10⁵至2×10⁶ cells/mL之间,避免过度密集或稀疏。

  3. 无菌操作

    • 所有操作需在无菌条件下进行,定期检测细胞是否有污染。

  4. 细胞状态监测

    • 定期观察细胞形态和生长状态,若发现异常(如细胞聚集、生长缓慢等),及时排查原因。


七、售后服务

  • 细胞质量问题:在收到细胞后1个月内,若发现细胞存在污染、死亡或其他质量问题,可联系技术支持,我们将免费重新发送一次细胞。

  • 技术支持:提供细胞培养、实验设计及结果分析的技术支持。


以上为C57小鼠巨噬细胞永生化细胞的产品介绍,供实验室参考使用。如有任何疑问,请及时联系技术支持或相关专家。

联系我们

TEL:021-34661275  点击拨打热线