细胞培养条件

培养条件	空气，95%；CO2，5% ；37℃
生长特性	贴壁生长	冻存条件	无血清冻存液（货号：C7001）
培养体系	DMEM高糖 + 10%FBS + 1%P/S
传代方法	第一次建议1:2传代	传代情况	2天换液
备注	天气寒冷可能会导致细胞冷缩脱落，如脱落较多，参考下列（四、注意事项），如脱落不多正常操作即可。

 

一、细胞背景

BBIEC-C4细胞是一种牛肠上皮细胞系，来源于牛的小肠组织。该细胞系具有典型的上皮细胞特征，广泛应用于肠道生物学、病原体感染机制、药物吸收及毒性研究等领域。BBIEC-C4细胞在肠道屏障功能、免疫反应及肠道疾病模型研究中具有重要价值。

供应商：雅吉生物
雅吉生物是一家专注于细胞培养、细胞鉴定及细胞相关产品研发的高科技企业。我们提供高质量的细胞系、培养基及相关试剂，并配备专业的技术支持团队，确保客户在细胞培养和实验过程中获得最佳体验。

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二、鉴定情况

为确保细胞系的正确性，需进行以下鉴定：

1. 形态学鉴定：

   • BBIEC-C4细胞呈多边形，贴壁生长，具有典型的上皮细胞形态。

2. 免疫荧光染色：

   • 检测上皮细胞标志物（如角蛋白、E-cadherin）的表达。

3. STR profiling：

   • 通过短串联重复序列（STR）分析，确认细胞系的特异性。

4. 功能鉴定：

   • 通过跨膜电阻（TEER）测定和屏障功能实验验证细胞的上皮屏障特性。

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三、研究方向和意义

1. 肠道屏障功能研究：

   • 研究肠道上皮细胞的屏障功能及其在肠道健康中的作用。

   • 探索肠道屏障损伤与疾病（如炎症性肠病、肠漏综合征）的关系。

2. 病原体感染机制研究：

   • 用于研究肠道病原体（如细菌、病毒、寄生虫）的感染机制及宿主免疫反应。

3. 药物吸收与毒性研究：

   • 用于评估药物在肠道中的吸收、代谢及毒性作用。

   • 研究药物对肠道上皮细胞屏障功能的影响。

4. 肠道疾病模型构建：

   • 用于构建肠道炎症、感染及肿瘤等疾病模型，研究其发病机制及治疗方法。

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四、文献参考

• 可根据具体实验需求，提供相关文献支持。

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五、细胞复苏和冻存步骤

1. 细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的BBIEC-C4细胞，迅速放入37°C水浴中解冻。

• 将细胞悬液转移至15 mL离心管中，加入5 mL预热的完全培养基（DMEM/F12 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin）。

• 轻轻混匀，1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用新鲜培养基重悬细胞，转移至T25培养瓶中，置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。

2. 细胞冻存

• 收集对数生长期的细胞，1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞，调整细胞密度至5×10⁶ cells/mL。

• 分装至冻存管中，逐步降温至-80°C，24小时后转移至液氮中长期保存。

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六、注意事项

1. 培养基：

   • 使用DMEM/F12培养基，添加10% FBS和1% Penicillin-Streptomycin。

   • 培养基需定期更换，避免营养耗尽。

2. 细胞密度：

   • 保持细胞融合度在80%-90%之间，避免过度生长导致细胞老化。

3. 无菌操作：

   • 所有操作需在无菌条件下进行，定期检测细胞是否有污染。

4. 细胞状态监测：

   • 定期观察细胞形态和生长状态，若发现异常（如细胞变圆、脱落等），及时排查原因。

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七、售后服务

• 细胞质量问题：在收到细胞后1个月内，若发现细胞存在污染、死亡或其他质量问题，可联系技术支持，我们将免费重新发送一次细胞。

• 技术支持：提供细胞培养、实验设计及结果分析的技术支持。

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以上为BBIEC-C4牛肠上皮细胞的产品介绍，供实验室参考使用。如有任何疑问，请及时联系技术支持或相关专家。