一、产品组分
试剂盒组分 | 规格 | 保存条件 | 有效期 |
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Human Dental Pulp Stem Cells | - | - | - |
Osteogenic Differentiation Complete Medium(成骨诱导液,即用型) | 100 mL | 2~8℃,避光 | 3个月 |
Dye Liquor: Alizarin Red Solution(茜素红染色液) | 10 mL | 2~8℃,避光 | 12个月 |
注意:染色液为独立包装组分,请勿与培养基混用。
用途:本产品仅用于科研实验,不可用于临床治疗。
二、产品描述
本产品是雅吉生物专为人牙髓间充质干细胞研制优化的成骨诱导分化培养基试剂盒,用于增强人牙髓间充质干细胞向成骨细胞方向诱导分化的能力。在库产品均通过生物安全检测和产品质量检测,体系稳定有效,现货发送,性价比高。雅吉生物专业的研发团队可提供最有效的技术指导,保证售后品质。
三、质检标准
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pH值:7.2~7.4
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内毒素含量:<10 EU/mL
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生物安全:细菌、真菌、支原体检测阴性
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质量检测:诱导测试合格
运输方式:产品冰袋冷藏运输。
四、检验原理
茜素红是一种广泛应用于生物医学样本检验的示钙染剂。游离的钙离子不能与茜素红形成红色沉淀,而固化的钙质结节则能被染成红色。干细胞在诱导培养基作用下,会逐渐向骨细胞方向分化,产生明显的泌钙反应,形成钙盐结晶或钙质结节,均能被茜素红染色。
五、使用说明
1. 成骨诱导分化操作
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明胶包被培养器皿
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干细胞培养较长时间后,可能会出现脱壁卷边或漂浮现象,建议使用0.1%明胶溶液对培养器皿进行包被。
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准备合适的培养器皿,取适量明胶覆盖底面,37°C静置30分钟,吸取晾干即可使用。
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接种干细胞
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取对数生长期的细胞,按照2.0×10⁴ cells/cm²的细胞密度接种至包被后的培养器皿中。
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于37°C、5% CO₂培养环境下培养至汇合度60~70%,弃掉上清,加入成骨诱导分化培养基。
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细胞分化诱导
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于37°C、5% CO₂培养环境下培养约14~21天,每2~3天换液一次,并注意观察细胞形态变化。
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根据细胞钙盐结晶析出和钙质结节形成的情况,决定终止细胞诱导的时间,并进行染色鉴定。
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2. 染色鉴定
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细胞固定
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吸去培养基,使用适量1× PBS清洗一次,弃去后取适量4%中性甲醛溶液覆盖培养器皿底面,室温固定30~60分钟。
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弃去固定液,再使用1× PBS清洗两次。
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茜素红染色
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加入适量茜素红染色液,染色3~5分钟。
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吸走茜素红染色液,用1× PBS清洗两次,并加入适量1× PBS避免细胞干燥。
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诱导评估
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显微镜下观察成骨染色效果,并进行图像采集和诱导评估。
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诱导成功时,钙质结节与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色。
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注意:干细胞的成骨分化水平因细胞类型、细胞供体来源、培养条件、细胞代次、细胞状态和分化时间等因素而异。
六、售后服务
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细胞质量问题:在收到细胞后1个月内,若发现细胞存在污染、死亡或其他质量问题,可联系技术支持,我们将免费重新发送一次细胞。
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技术支持:提供细胞培养、实验设计及结果分析的技术支持。
七、参考文献
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可根据具体实验需求,提供相关文献支持。
以上为雅吉生物提供的人牙髓间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒的详细说明书,供实验室参考使用。如有任何疑问,请及时联系技术支持或相关专家。